内容正文:
第一节
细胞培养是动物细胞工程的基础
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在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤移植到伤处,使皮肤愈合。但大面积烧伤患者缺乏足够的自体皮肤,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?
通过细胞培养构建人造皮肤
2
从动物体中获得相关组织,分散成单个细胞,在适宜的培养基下让细胞生长和增殖的技术。
动物细胞培养
原理:细胞增殖
培育的终点:细胞
通过植物细胞培养技术,我们可以直接克隆植物,那我们能通过动物细胞培养克隆出动物吗?
动物细胞培养需要哪些条件?
动物细胞培养的条件
营养物质
其他条件
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糖类
氨基酸
无机盐
维生素
无菌、无毒的环境
适宜的温度、湿度、pH
适宜的气体环境
水
生长因子
体外培养动物细胞需要提供哪些营养物质?
水、无机盐、糖类、氨基酸、无机盐、维生素、生长因子等
合成培养基
根据细胞生存所需的物质种类和含量严格配置而成的培养基
液体培养基
动物血清:含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,可以补充合成培养基中缺乏的物质
天然培养基
主要来自动物体液或动物组织分离提取液,成分复杂,来源受限
实际培养时,在合成培养基中添加一定比例的动物血清
动物细胞培养最好选择固体培养基还是液体培养基?
动物细胞培养的条件
无菌、无毒的环境
无菌
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
定期更换培养液,以便清除代谢物
无毒
超净工作台
在培养基中添加抗生素
动物细胞培养的条件
适宜的温度、pH
多以37℃,温差一般不超过±0.5℃
温度:
pH:
多数细胞生存的适宜pH在7.2-7.4
气体环境
O2:
细胞代谢所必需的
CO2:
维持培养液的pH
(95%空气和5% CO2 )
CO2 培养箱
动物细胞培养的过程
选择什么样的细胞进行细胞培养?
幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更容易培养,原因是这些细胞分裂能力强。
用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块,使组织块分散成单个细胞的目的是什么?
①使细胞与培养液充分接触,一方面保证细胞所需的O2和营养物质的供应,另一方面保证细胞内代谢废物的及时排出;
②使得在细胞水平操作的其它技术得以实现。
动物细胞以组织的形式存在,取材后对其进行怎样的处理?
机械法、胰蛋白酶处理
胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?那将动物组织分散成单个细胞时要注