1.2.2 微生物的选择培养和计数（学案） - 【新课程学案】新教材2022-2023学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版2019 山东河北湖南江苏辽宁专用）

生物学 选择性必修3 XINKECHENG XUEAN 第2课时 ⊙学习目标 1.阐明微生物选择培养的原理和用途 微生物的选择培养和计数 2.概述测定微生物数量的方法。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 [四层]学内蓉 落实必备知识 开卷预习一刻钟 [特别提醒] 将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精 一、主干知识集一填 的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然 (一)选择培养基及微生物的选择培养 后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。 1.实验室中微生物筛选的原理 (3)培养分离：待涂布的菌液被培养基吸收 人为提供有利于目的菌生长的条件（包括'后，将平板 ,放入 的恒温培养 营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生： 箱中培养1~2d。在涂布有合适浓度菌液的平 物的生长。 板上就可以观察到分离的 2.选择培养基 (二)微生物的数量测定 是指在微生物学中，允许 的微 1.稀释涂布平板法 生物生长，同时 其他种类微生物 生长的培养基。 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的 3.微生物的选择培养（稀释涂布平板法） 计数 一个 ,来源于样品稀释液中的一个活 原理 菌。通过统计平板上的 ,就能推测出 (1)系列稀释操作（以土壤样品为例） 样品中大约含有多少活菌 1mL ImL I mL I mL ⊥L 1mL 凰焊 -1×10 -1×101x1051×10 -1×101×10/ 计数 为了保证结果准确，一般选择菌落数为 IXI0 角 标准 的平板进行计数 90mL.无菌水 9L无水 ①将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥 样品的 将直接影响平板上的菌落数 目。通常选用一定稀释范围的样品液进行培 形瓶中，充分摇匀。 计数 养，以保证获得菌落数为 、适于计数 ②取1mL上清液加入盛有9mL 方法 的平板。在 下，应至少对 个 的试管中，依次等比稀释。 平板进行重复计数，然后求出平均值 (2)涂布平板操作 2.显微镜直接计数法 取菌液 取0.1ml菌液，滴珈到 表面 涂布器 将涂布器浸在盛有 的烧杯中 一涂布器 利用特定的 或 消毒 阻 计数 在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积 方法 涂布器 将涂布器放在火焰上灼烧，待涂 的样品中微生物的数量 灭菌 布器上的酒精燃尽、涂布器 后，再进行涂布 涂布 用涂布器将 均匀地涂布在 是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的 优点 平板 培养基表面。涂布时可转动培 方法 养皿，使涂布均匀 14 XINKECHENG XUEAN第1章发酵工程 (三)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 三、边角知识辰一展 ①上壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它] 1.(教材第18页“相关信息”思考)细菌计数板和血细胞 分离 原理 能合成 计数板主要适用于什么微生物的计数？ ②配制以为唯氨源的培养基，能够生长的 细菌就是能分解尿茶的细菌 上壤 2.(教材第18、19页“探究·实践”思考)利用尿素做唯 在酸碱度接近 取样 的潮湿土嚷中取样 一氮源的选择培养基筛选出能分解尿素的细菌后，还 分 样品 一般选用 倍 可以利用什么方法进一步鉴定分离出的菌种？ 过程 稀释 稀释液 培养、 每隔24h统计 ·次菌落数目，选取 观察 的记录作为结果 ① 可作为南种鉴定的重要依据 掩卷归拢5分钟 ②在培养基巾加入翰红指示剂，若指示剂变 鉴定 计数 红，可确定纵闲能分解尿素 一、知识脉络星一理 ③统计平板的肉落数，计算每克十样巾的尿素分 解闲的数月 微生物的选择培养和计数 二、重要图示品一品 逃择培养 数量测定 (教材第20页“拓展应用”第2题) 选择培 筛选 选择培养 原理 统计方法 如图是几种纤维素分解菌在刚果 养基的原理 (稀释涂布 :特点 及实 平板法) 红培养基上形成的透明圈的示意 稀释涂布 显微镜直 例 平板法 接计数法 图，请分析原理。 二、结论语句纪一记 1.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显 微镜直接计数法。 2.稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果 往往比实际活菌数目低。 3.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可可用尿 素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。 2四1￥习为容2 融通关键能力 提能点（一） 稀释涂布平板法与微生物的选择培养 任务驱动 :(1)对样品悬液怎样进行梯度稀释？ 菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也 可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检 样品进行卫生学评估提供证据。如图是某样品选择培 (2)涂布器一般是在酒精中浸泡，然后放在酒精 养简化流程图，请分析回答下列问题： 灯火焰上灼烧灭菌，该操作的目的是什么？ 样品 样品悬液 梯度稀释 涂布 了15 |生物学选择性必修3 XINKECHENG XUEAN (3)下图是涂布平板操作的