内容正文:
第三章 动物细胞工程
第三节 通过细胞融合可产生具有新特性的细胞
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。那么,如何获得B细胞杂交瘤呢?
从社会中来
与植物体细胞杂交技术中的原生质体融合类似,动物细胞工程中也包括细胞融合技术。
细胞融合就是在一些融合因子的作用下,将两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的技术。细胞融合可以在基因型相同的细胞间进行,也可以在基因型不同的同种生物细胞间以及亲缘关系非常远的不同种生物细胞间进行。
通过细胞融合可以产生具有新特性的细胞,因此,这一技术已经成为研究细传、细胞免疫、肿瘤等的重要手段。
那么,两个动物细胞是如何融合成一个细胞?细胞融合技术有什么应用?
1.概念:
3.原理:
2.结果:
4.诱导方式:
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的杂交细胞。
动物细胞没有细胞壁,可以直接诱导融合。
物理法:电流刺激
化学法:聚乙二醇(PEG)
生物法:灭活的病毒
与植物原生质体融合的方法相同
——动物细胞融合特有
细胞膜的流动性
动物细胞融合技术
两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞
细胞融合原理:细胞膜出现一定程度损伤,细胞相互粘连而融合。
应用: (1)利用淋巴细胞和癌细胞的融合,培育单克隆抗体;
(2)基因定位。
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程:
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
↓
细胞膜被病毒颗粒穿通
↓
细胞膜连接
↓
细胞核融合,形成杂交细胞
什么是病毒的灭活?
灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力,但是并不破坏病毒的抗原结构。
思考:19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象?
病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
肺结核病人病理切片
植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
细胞融合前的处理方法
诱导细胞融合的方法
细胞融合成功的标志
主要用途
意义
细胞膜具有一定的流动