内容正文:
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实验拓展课1
三法破解酶的实验探究
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一、“试剂检测法”或“酶解法”鉴定酶的本质
1.试剂检测法
(1)设计思路:从酶的化学本质上来讲,绝大多数的酶是蛋白质,少数的酶是RNA。对酶本质的鉴定常常变相地考查蛋白质或RNA的鉴定方法。因此,利用双缩脲试剂与蛋白质作用产生紫色反应,而RNA与吡罗红染液作用显红色的原理设计鉴定方案。
悟一悟
理
论
归纳
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(2)设计方案
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2.酶解法
酶必须保持正常的结构才能发挥催化作用,因此可以分别利用蛋白酶和RNA酶处理待鉴定酶,再观察其功能是否受影响来确定该酶的本质,设计方案如下:
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二、用“对比实验法”探究或验证酶的高效性和专一性
1.验证酶的高效性
(1)设计思路:通过将不同类型催化剂(主要是酶与无机催化剂)催化底物的反应速率进行比较,得出结论。
(2)设计方案
项目 实验组 对照组
材料 等量的同一种底物
试剂 与底物相对应的酶溶液
(如生物材料研磨液) 等量的无机催化剂
现象 反应速率很快或反应用时短 反应速率缓慢或反应用时长
结论 酶具有高效性
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2.验证酶的专一性
(1)设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
(2)设计方案
项目 方案一 方案二
实验组 对照组 实验组 对照组
材料 同种底物(等量) 与酶相对应的底物 另外一种底物
试剂 与底物相对应的酶 另外一种酶 同一种酶(等量)
现象 发生反应 不发生反应 发生反应 不发生反应
结论 酶具有专一性
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2.设计方案
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[易错提醒] 酶活性探究实验中的“三宜”“四不宜”
(1)若底物选择淀粉和蔗糖,用淀粉酶来验证酶的专一性时,检测底物是否被分解的试剂“宜”选用斐林试剂,“不宜”选用碘液,因为碘液无法检测蔗糖是否被分解。
(2)若选择淀粉和淀粉酶探究酶的最适温度,检测底物被分解的试剂“宜”选用碘液,“不宜”选用斐林试剂,因为用斐林试剂检测时需水浴加热,而该实验中需严格控制温度。
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(3)在探究酶的最适温度的实验中,“不宜”选择过氧化氢(H2O2)和过氧化氢酶作实验材料,因为过氧化氢(H2O2)在常温常压时就能分解,加热的条件下分解会加快,从而影响实验结果。
(4)在探究pH对酶活性影响时,“宜”保证酶的最适温度(排除温度干扰),且将酶溶液的pH调到实验要求的pH后再让反应物与底物接触,“不宜”在未达到预设pH前,让反应物与酶接触。
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命题点1 实验基础
1.(2021·黑龙江大庆期中)下列关于探究温度对酶活性影响的实验甲和探究pH对酶活性影响的实验乙的叙述,错误的是( )
A.实验甲不应该选择H2O2酶,实验乙不应该选择唾液淀粉酶
B.实验甲每组实验的底物溶液和酶液的温度应设置相同后再混合
C.实验乙的自变量为pH,无关变量有温度、酶液的量等
D.实验甲和乙所探究的因素对酶活性影响的机理完全相同
D
练一练
命
题
突破
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解析:选D。不同温度条件下过氧化氢自身分解的速率不同,所以实验甲不应该选择H2O2酶,酸性条件下淀粉易分解,所以实验乙不应该选择唾液淀粉酶,A正确;实验甲每组实验的底物溶液和酶液的温度应设置相同后再混合,以保证反应结果是预设实验温度下的结果,B正确;实验乙的自变量为pH,无关变量有温度、酶液的量等,C正确;低温条件下酶的活性降低,但空间结构不变,高温、过酸、过碱条件下酶会变性失活,所以实验甲和乙所探究的因素对酶活性影响的机理不完全相同,D错误。
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2.下列有关酶的探究实验的叙述,合理的是( )
C
选项 探究内容 实验方案
A 酶的高效性 用FeCl3和过氧化氢酶分别催化等量H2O2分解,待H2O2完全分解后,检测产生的气体总量
B 酶的专一性 用淀粉酶催化淀粉水解,检测是否有大量还原糖生成
C 温度对酶活性的影响 用淀粉酶分别在热水、冰水和常温下催化淀粉水解,反应相同时间后,检测淀粉分解程度
D pH对酶活性的影响 用H2O2酶在不同pH条件下催化H2O2分解,用斐林试剂检测
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解析:选C。探究酶的高效性时,以无机催化剂和酶作为自变量,观察在相同时间里产生的气体量,而不是待H2O2完全分解后再检测,A错误;探究酶的专一性,可以用同一种酶催化不同的底物,观察底物的反应情况,也可用不同酶催化同一种底物,观察底物的反应情况,而选项B中只有淀粉酶催化淀粉水解,不符合对照原则,B错误;探究温度对酶活性影响时,自变量是温度,通常至少有三组实验,观察不同温度下淀粉酶催化淀粉水解的情况,可以采用在相同时间内,检测淀粉的分解程度的方式,C正确;探究pH对酶活性的影响时,需要用同一种酶在不同的pH下催化相同底物的水解,在相同时间内,检测底物的分解程度,但H2O2分解后的产物是水和氧气,因而不能用