专题32 动物细胞工程-备战2023年高考生物一轮复习全考点精选课件（浙江新教材、新高考专用）

浙科版2019版总复习选择性必修三 第一节　体液调节是通过化学信号实现的调节 第一节　体液调节是通过化学信号实现的调节 第二节　神经系统通过下丘脑控制内分泌系统 第二节　神经系统通过下丘脑控制内分泌系统 第32课时 动物细胞工程 第十单元 生物技术工程 考点一　动物细胞培养 1.概念： 首先、将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或胰酶消化，使其分散成单个的细胞，然后在人工控制的培养条件下，使这些细胞得以生长、增殖的过程。 注：胰酶的作用：酶解、消化组织中的胶原蛋白纤维和细胞外的其他成分，获得单个细胞悬液，使细胞与培养液充分接触。（胶原蛋白酶） 思考：能不能用胃蛋白酶代替胰酶（胰蛋白酶）？ 2.原理： 细胞增殖 使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质，长时间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成损伤。 2 胰蛋白酶或机械处理 剪碎 动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官 单个细胞悬浮液 放在培养瓶中培养 分瓶培养 原代培养 传代培养 3.过程： 注意：动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，原因是胚胎组织或幼龄动物的组织或器官的细胞，分裂、增殖旺盛，细胞培养的成功率高。 4.培养过程中细胞生长的特点： a、细胞贴附生长：细胞贴附在培养瓶的内壁上分裂生长的现象。贴附是有机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式，包括细胞与细胞间的相互接触和细胞与细胞外基质之间的相互接触。体外培养时，绝大多数细胞仍然保持了贴附生长的特性， 必须贴附在某一固相支持物上生长。（来源于血液、淋巴组织的细胞及某些肿瘤细胞呈悬浮生长） b、细胞的接触抑制：当细胞由于移动而相互靠近发生接触时，细胞不再移动，接触区域的细胞膜皱褶样活动停止，最终细胞分裂停止，这种现象称为接触“ 抑制。正常细胞并不重叠于其他细胞之上生长，而是单层生长。癌细胞无接触抑制而发生堆积。是否接触抑制可作为区分正常细胞与癌细胞的标志之一。 注意：由于细胞的贴壁生长和接触抑制现象，所以在培养过程中要定时加入胰蛋白酶处理，并且一段时间后要分瓶，进行传代培养。 a、无菌、无毒： （加抗生素抑细、真菌，培养基灭菌，定期更换培养液，清除代谢废物保证无毒 ） b、营养物质和激素： （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等） c、适宜的温度和pH： （36.5±0.5℃，PH7.2---7.4 ） d、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ），加入CO2是为了维持培养液中的PH值，加入 O2是为了保证细胞的需氧呼吸，放入CO2 培养箱 5.动物细胞培养是所需要的条件： 6. 原代培养和传代培养 (1)原代培养：细胞或组织离开有机体后的首次培养。 (2)传代培养 ①需要传代培养的原因：随着时间的延长，体外培养的细胞数量不断增加。当增长到一定程度后，由于发生接触抑制或培养空间的限制及营养物质的消耗枯竭，生长会逐渐减慢，甚至停止并死亡。 ②操作：将原培养瓶内的细胞分离并稀释后转到多个培养瓶中，在新的培养基中进行传代培养。 ③要求：一般来说，原代培养的贴壁细胞达到生长基质的80%表面面积后可进行传代培养。传代过晚，可影响下一代细胞的动能状态。贴壁生长的细胞需经酶消化制成细胞悬液后才能传代。 单击此处编辑母版文本样式 动物细胞培养中（至少）有两次用到胰酶； 第一次的目的是处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，大部分中间细胞因不能获得穿透能力有限的营养物质而代谢不良。为获取大量生长良好的细胞，必须先把组织细胞分散开，使细胞解离出来。解离细胞的方法是先将组织块剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等消化处理一段时间，使组织松散，细胞分开。 第二次的目的是使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 （每一次传代培养都需要用到胰酶） 思考：动物细胞培养中用到了几次胰酶？作用相不相同？ 8 （1）细胞系 a、含义：可连续传代的细胞，原代培养物首次传代时就成为细胞系（原代培养物经传代培养得到的一群不均一的细胞）（异质性） b、分类： 连续（无限）细胞系 有限细胞系：不能连续培养。由二倍体细胞传代培养建成；有接触抑制 特点：是发生转化了的细胞系（遗传物质发生改变）， 大多数具有异倍体核型。 恶性细胞系：具有异体致瘤性 良性细胞系：但保留接触抑制现象， 不致癌。 含义：能连续培养下去的细胞系 分类 7、细胞系和细胞株 （2）细胞株 a、含义：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系 中获得的具有特殊性质的细胞，称为细胞株（