内容正文:
基
因
工
程
重组DNA技术的基本工具
基因工程的基本操作程序
基因工程的应用
蛋白质工程的原理和应用
第2节基因工程的基本操作程序
第1课时
赵全华
从社会中来
转基因抗虫棉
非转基因抗虫棉
1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年,我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个,减少农药用量40万吨,增收节支社会经济效益450亿元。
你知道转基因抗虫棉抗虫的机制是什么吗?
培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤?
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培育转基因抗虫棉的简要过程:
提取
棉花细胞(含抗虫基因)
苏云金芽孢杆菌
抗虫基因
与运载体DNA拼接
导入
普通棉花(无抗虫特性)
棉花植株(有抗虫特性)
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目的基因的筛选与获取
基因表达载体的构建
将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
前提
核心
关键
保证
基因工程的基本操作程序(四步)
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一、目的基因的筛选与获取
目的基因:
用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因,主要指的是编码蛋白质的基因
实例:
基因结构:
与生物抗逆性相关的基因(Bt抗虫基因)
与优良品质相关的基因
与生物药物和保健品相关的基因(胰岛素、干扰素基因)
与毒物降解相关的基因
与工业用酶相关的基因等
原核细胞的基因结构
真核细胞的基因结构
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cDNA不含有启动子、终止子和内含子。
基因结构
目的基因的获取方法:
(1)从基因文库中获取;(2)人工合成; (3)利用PCR技术扩增;
基因文库类型
基因组文库
cDNA文库
(包含一种生物的所有基因)
(包含一种生物的一部分基因)
从基因文库中寻找
聚合酶链式反应(PCR)扩增
化学合成法
目的基因的核苷酸序列未知:
目的基因的核苷酸序列已知
8
提取某种生物的全部DNA
一定大小的DNA片段
导入受体菌中储存
用适当的限制酶切
将DNA片段与载体连接
基因组文库
基因组文库的构建模式图
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成熟mRNA
成熟mRNA
cDNA文库
成熟mRNA
部分基因文库构建模式图
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基因组文库和 cDNA 基因文库的比较
文库类型 cDNA文库 基因组文库
文库大小
基因中启动子
基因中内含子
基因多少
物种间基因交流
小
大
无
有
无
有
某种生物的部分基因
某种生物的全部基因
可以
部分基因可以
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聚合酶链式反应( Polymer