内容正文:
选修1 生物技术实践
二轮冲刺复习
(1)无菌技术具体操作
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
无菌技术:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
条件 结果 常用的方法
消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法
灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 如牛奶的消毒
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源
4、紫外线消毒
……
(2)消毒的方法:
(四).统计细菌数目的方法
(1)显微镜直接计数法
①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。
②方法:用血细胞计数板计数。
③缺点:不能区分死菌与活菌。
(2)间接计数法(活菌计数法)
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长着一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(3)细菌分离与计数的实验流程
土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数。
回忆各种微生物汇总
大肠杆菌
利用尿素的细菌
黑曲霉、苹果青霉:果胶酶
枯草杆菌:a淀粉酶
酵母菌
醋杆菌
假丝酵母菌
预测:泡菜和亚硝酸盐(17.4)
果胶酶、淀粉酶(18.4)
a.尿素细菌,是分解尿素的细菌。从存在动物尿的地方很容易分离到。具有活性很高的脲酶。其代表种为巴氏芽孢杆菌和尿素小球菌。经常在含有尿素(20%)并用碳酸铵碱化的培养基中旺盛繁殖。对自然界的尿素转化起重要作用。
普通尿素(N≥46.4%)是酰铵态氮肥,所含氮素需经尿素细菌分泌的脲酶分解转化为铵态氮后,才能被植物吸收,利用率一般为30%-40%
尿素细菌生存于土壤、厩肥及污水中,是好氧性或兼厌氧性的细菌,在强碱性培养基中生长良好,最低的PH值是7,利用铵盐或尿素作为氮源,利用各种有机物(单糖、双糖、淀粉、有机酸等)为碳源(葡萄糖)和能源。代谢类型为异养需氧型或兼厌氧型。
b.霉菌:生长在固体培养基上的霉菌菌丝可分为三部分:①营养菌丝:深入的培养基内,吸收营养物质的菌丝;②气生菌丝:营养菌丝向空中生长的菌丝;③繁殖菌丝:部分气生菌丝发育到一定阶段,分化为繁殖菌丝,产生孢子。
C.枯草芽孢杆菌
(枯草杆菌一般指枯草芽孢杆菌)
需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛,对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名。
1.枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用
应用
2.枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧,造成肠道低氧,促进有益厌氧菌生长,并产生乳酸等有机酸类,降低肠道PH值,间接抑制其它致病菌生长
3.刺激动物免疫器官的生长发育,激活T、B淋巴细胞,提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高群体免疫力
4.枯草芽孢杆菌菌体自身合成 a-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类,在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用。
d.酵母菌
e.醋化醋杆菌:菌体细胞杆状,末端方,成短或长链,革兰氏阳性,无荚膜,运动。广泛存在于醋醪、饮料、水果、蔬菜及酸败的物质上。
工厂选择标准:
(2)2018.11与酿造果醋相比,利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋,需增加将淀粉分解成糖 的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成,其中甘露醇的主要作用是作为碳源 。
将淀粉分解成糖 作为碳源
氧化酒精快、耐酸性、不再分解醋酸、风味好
2017.11(一)回答与酿酒和制醋有关的问题:
(1)为了获得优良的酿酒红曲霉菌株,将原菌株的孢子诱变处理后制成较稀浓度的单孢子悬液,这样做的目的是在培养时有利于获得_________。
(2)大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后,用某酿酒酵母进行酒精发酵,发酵完毕后得到新鲜红曲酒,酒中乙醇浓度不超过15%。其主要原因是当发酵液中的乙醇浓度接近15%时,__________(A.乙醇氧化逐渐增强直至平衡B.葡萄糖分解逐渐增