内容正文:
2023年生物一轮复习疑难专项突破
专项2 与酶相关的实验探究
一、“试剂检测法”或“酶解法”鉴定酶的本质
专项梳理
1.试剂检测法
1)设计思路:从酶的化学本质上来讲,绝大多数的酶是蛋白质,少数的酶是RNA。对酶本质的鉴定常常变相地考查蛋白质或RNA的鉴定方法。因此,利用双缩脲试剂与蛋白质作用产生紫色反应和RNA与吡罗红染液作用显红色的原理设计鉴定方案。
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项目 实验组 对照组
材料 待测酶溶液 (等量)已知蛋白液
试剂 分别加入等量的双缩脲试剂
现象 是否呈现紫色 呈现紫色
结论 实验组呈现紫色说明该酶的化学本质为蛋白质,否则该酶的化学本质不是蛋白质
2)设计方案
2.酶解法
酶必须保持正常的结构才能发挥催化作用,因此可以分别利用蛋白酶和RNA酶处理待鉴定酶,再观察其功能是否受影响来确定该酶的本质,设计方案如下:
专项微练
1. 甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如图所示,请据图回答:
1) 甲、乙两种酶的化学本质分别是什么?请说出判断依据。
______________________________________________________________________________________________________________________________________________。
观察曲线图可知,甲酶的活性始终保持不变,表明甲酶不能被该种蛋白酶降解,则甲酶的化学本质是RNA,乙酶能被蛋白酶破坏,活性降低,则乙酶为蛋白质
2) 乙酶活性改变的机制是什么?其活性能否恢复?
__________________________________________________________________________________________________。
乙酶被降解的过程中,其空间结构会发生改变,从而使其活性改变,这种活性的改变不可逆转,故无法恢复
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3) 欲让甲、乙两种酶的变化趋势换位,应加入何类酶?
_____________。
4) 若用试剂检测法,可选用何种试剂,出现什么现象?
_________________________________________________。
RNA水解酶
双缩脲试剂、吡罗红试剂,乙酶呈紫色,甲酶呈红色
二、用“对比实验法”探究或验证酶的高效性和专一性
专项梳理
1.验证酶的高效性
1)设计思路:通过将不同类型催化剂(主要是酶与无机催化剂)催化底物的反应速率进行比较,得出结论。
2)设计方案
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项目 实验组
材料 等量的同一种底物
试剂 与底物相对应的酶溶液 等量的无机催化剂
现象 反应速率很快,或达到平衡用时短 反应速率缓慢,或达到平衡用时长
结论 酶具有高效性
2.验证酶的专一性
1)设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
2)设计方案
项目 方案一 方案二
实验组 对照组 实验组 对照组
材料 同种底物(等量) 与酶相对应的底物 另外一种底物
试剂 与底物相对应的酶 另外一种酶 同一种酶(等量)
现象 发生反应 不发生反应 发生反应 不发生反应
结论 酶具有专一性
专项微练
2. [2020河南洛阳尖子生联考]研究小组为验证酶的特性进行相关实验,部分实验操作如表所示,下列叙述错误的是( )
实验步骤 试管序号
1 2 3 4 5
步骤1 3%可溶性淀粉溶液 — 2 mL — 2 mL —
3%蔗糖溶液 2 mL — 2 mL — 2 mL
步骤2 人新鲜唾液 1 mL 1 mL — — —
蔗糖酶溶液 — — 1 mL 1 mL —
蒸馏水 — — — — 1 mL
步骤3 ……
A
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[解析] 缓冲液一般应在加入底物和酶之前加入,步骤3应是向各个试管中加入等量斐林试剂并水浴加热,A错误。
A. 步骤3是向5支试管中加等量的缓冲液
B. 试管2和4无法验证淀粉酶具有专一性
C. 试管3和4可以证明蔗糖酶具有专一性
D. 该实验无法验证唾液淀粉酶具有高效性
3. [2021福建泉州联考]某科研小组将新鲜的萝卜磨碎、过滤制得提取液,以等体积等浓度H2O2为底物,对提取液中过氧化氢酶的活性进行相关研究,得到如图所示的实验结果。下列说法错误的是( )
实验一
实验二
A. 从实验一可以看出,与加Fe3+相比,单位时间内加萝卜提取液产生的氧气多,其原因是酶降低反应活化能的效果更显著
B. 若将实验一中的萝卜提取液换成等量的新鲜肝脏研磨液,则O2产生总量明显增多
C. 实验二是在最适温度下测定相同时间内H2O2的剩余量,引起A、B曲线出现差