第1章 第2节 2 微生物的选择培养和计数-（教师WORD）2021-2022学年高中生物【精讲精练】人教版选择性必修3 生物技术与工程 新课标辅导

二　微生物的选择培养和计数

【学习目标】

1．运用生物与环境相适应的观点来解释选择培养基的原理

2．掌握通过调整培养基配方的方法来有目的地培养某种微生物

3．学会测定微生物数量的常用方法——科学思维

知识点一　选择培养基及微生物的选择培养

[新知梳理]

1．实验室中微生物筛选的原理

人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。

2．选择培养基

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

3．稀释涂布平板法

(1)原理：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

(2)步骤：

①系列稀释操作：

a．101～106试管中分别盛有9_mL无菌水。

b．用移液管吸取1_mL培养的菌液注入101倍稀释的试管中，得到稀释菌液。

c．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液注入102倍稀释的试管中。依次类推，完成菌液的稀释。

d．移液管要经过灭菌，并且操作应在酒精灯火焰附近完成。

②涂布平板操作；

a．涂布器消毒：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中

　↓

b．取菌液：取0.1 mL菌液滴加到培养基表面

　↓

c．涂布器灭菌：将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽，冷却后涂布

　↓

d．涂布平板：用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

③培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37_℃的恒温培养箱中培养1～2 d。

[互动探究]

1．要想将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？

提示：尿素作为培养基的唯一氮源。

2．涂布平板的所有操作为什么都应在火焰附近进行？

提示：在酒精灯火焰旁操作可以保证无菌，防止杂菌污染。

3．利用稀释涂布平板法纯化分解尿素的细菌时，经培养后发现培养基上出现多种菌落，可能的原因有哪些？

提示：出现杂菌污染的可能原因有：培养基制备过程中被杂菌污染；接种过程中，无菌操作不符合要求；系列稀释时，无菌操作不符合要求等。

[归纳总结]

1．两种纯化微生物的方法的比较

 

 

2.稀释涂布平板法注意事项

(1)每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离酒

精灯火焰1～2 cm处。

(2)涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。

(3)不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。

(4)酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物品。

[题组通关]

1．关于平板划线法、稀释涂布平板法叙述错误的是(　　)

A．均将微生物接种在固体培养基的表面

B．获得的每个菌落均是由一个细胞繁殖而来的子细胞群

C．都应在酒精灯火焰附近进行操作，以防止杂菌污染

D．稀释分散菌种的原理不同，均能达到分离纯化微生物的目的

解析　将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；用稀释涂布平板法时，如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能是由一个细菌细胞繁殖形成的，B错误；平板划线法和稀释涂布平板法都应在火焰附近进行操作，以防止杂菌污染，C正确；平板划线法和稀释涂布平板法稀释分散菌种的原理不同，但是能达到分离纯化微生物的目的，D正确。

答案　B

2．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：

(1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生____________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是________________。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是________________________(答出两点即可)。

(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________________________________

________________________________________________________________________(答出两点即可)。

解析　(1)能分解尿素的细菌体内应含有脲酶；能分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物，可用葡萄糖等有机物作为碳源。进入细菌体内的葡萄糖既能为细胞的生命活动提供能量，又可为其他有机物的合成提供原料。(2)筛选可分解尿素的细菌，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，而能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用