3.2.3DNA片段的扩增及电泳鉴定-导学案-2021-2022学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

高二生物导学案 第三章 第2节《DNA片段的扩增及电泳鉴定》导学案3 班级 姓名 【学习目标】　1.了解PCR和电泳鉴定的基本原理。 2.尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。 【预习案】 一、实验原理 1．DNA片段的扩增 PCR利用了 原理，通过 来控制DNA双链的 。 2．琼脂糖凝胶电泳 (1)带电粒子：DNA分子具有 ，在一定的pH下，这些基团可以带上 。 (2)迁移动力与方向：在 的作用下，带电分子会向着与它所带电荷 的电极移动，这个过程就是电泳。 (3)迁移速率：在凝胶中DNA分子的迁移速率与 、 有关。 (4)检测：凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为 下被检测出来。 二、方法步骤 1．移液：用 按照配方或PCR试剂盒的说明书，在微量离心管中依次加入 。 2． ：待所有的组分都加入后，盖严离心管的盖子。 3．离心：将微量离心管放在离心机上，离心约 ，使反应液集中在管的 。 4．反应：将装有反应液的微量离心管放入 中，设置程序进行反应。 5．根据待分离的DNA片段的大小，用 配制琼脂糖溶液，一般配制质量分数为 的琼脂糖溶液，并加入 混匀。 6．将扩增得到的PCR产物与 (内含指示剂)混合，再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。 7．接通电源，根据电泳槽阳极至阴极之间的距离来设定电压，一般为 。待指示剂前沿迁移接近