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第3章 动物细胞工程 第一节细胞培养是动物细胞工程的基础
1、 填空题
1、 动物细胞工程常用的技术包括: 、 、 等。其中 是动物细胞工程的基础。
2、 动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成 后,在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程。
3、 动物细胞的生长和增殖需要适宜的 、 、 、 条件;需要提供 、 条件;需要充足的 。
4、 可模拟类似体内的生长环境条件而用于动物细胞培养。
5、 大多数情况下,细胞生长的最适宜温度是 ℃,温差一般不超过 ℃。如果温度达到40℃以上,细胞很快就会死亡。
6、 培养箱不仅提供了 ,还能控制稳定的 环境,大多数细胞适宜的PH为7.2—7.4,偏离此范围对细胞产生有害影响。
7、 造成培养基PH波动的主要物质是细胞代谢产生的 ,为解决这一问题,可采用 的方式,使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养器皿,再通过给培养箱提供恒定的 的CO2浓度,使之与培养基中的 处于平衡状态,调节PH的相对稳定。
8、 95%的空气可以保证 对氧气的需要。
9、 培养动物细胞需要提供 、 的条件。 是决定细胞培养成败的关键,无菌意识和无菌操作应贯穿整个培养过程的始终。培养的细胞一旦被污染,多数无法挽回,需 。以防止污染扩大而影响其他细胞。
10、 防止污染, 是关键。除了培养材料、培养基、培养环境、操作过程严格控制无菌外,在培养基中加入 也能抑制 和 的生长。从而预防污染。常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素等。
11、 动物细胞培养液中常含有在高温条件下变性失去功能的物质,如血清等,因而对培养液的这些成分采用 除菌(用G6玻璃砂漏斗)。
12、 此外,为防止细胞代谢产物的有毒物质危害细胞,应定期 。
13、 动物细胞的生长和增殖需要充足的 。
14、 培养动物细胞的培养基通常为 培养基。其基本成分包括水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等。按培养基的来源可分为天然培养基和合成培养基。
15、 天然培养基主要来自 或动物组织分离提取液,如 、淋巴液、鸡胚浸出液等。其特点是成分复杂, 。
16、 合成培养基是根据细胞生存所需物质的种类和含量,用人工方法模拟合成的,便于对各种成分进行人工控制和标准化。由于人们并没有完全了解动物细胞所需要的全部物质,实际工作往往将天然培养基与合成培养基结合使用,如在 中添加一定比例的 或其他天然成分。
17、 动物细胞培养的过程包括 和 。
18、 原代培养是指细胞或组织离开有机体后的 培养。 是原代培养的第一步,所取动物组织块一般体积大于 mm3。若直接培养组织块,只有处于周边的少量细胞可以生存和繁殖,大部分中间细胞因不能获得 有限的营养物质而代谢不良。
19、 为了获取大量生长良好的细胞,必须先把组织细胞 ,使细胞解离出来。
20、 解离细胞的方法是先将组织块 ,用 酶或 酶等消化处理一段时间,使组织分散,细胞分开。再将分散的细胞制成 。进一步接种至培养瓶(卡氏瓶)中。
在人工控制的培养条件下,进行 培养。
21、 体外培养的动物细胞往往具有 和 等特点。
22、 是有机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式,包括细胞与 间的相互接触和细胞与 之间的相互接触。
23、 体外培养时, 细胞仍然保持了贴附生长的特性,必须贴附在某一固相支持物上如培养瓶壁上生长;来源于血液、淋巴组织的细胞以及某些肿瘤细胞不需要贴附在支持物上,而是呈 状态。
24、 接触抑制是体外细胞培养时 型细胞生长的特性。
25、 一般情况下,正常的细胞在培养过程中不停顿地活动和运动,其外周的细胞膜呈现一些特征性的 活动。但是,当细胞由于移动而相互靠近发生接触时,细胞不再移动,接触区域的细胞膜皱褶样活动停止,最终 停止,这种现象称为 。
26、 由于细胞之间有