5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段课件2021-2022学年高二下学期生物人教版选修1

专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 课题3 血红蛋白的提取与分离 DNA指纹法在案件侦破中有重要作用，刑侦人员通过案发现场的血液、头发等样品中提取的DNA，与犯罪嫌疑人的DNA进行比较，就由可能为案件的侦破提供证据。 思考：犯罪嫌疑人留在现场的样品一般都是极少量的，刑侦人员要怎样才能得到足够量的DNA呢？ 课题背景 ★分子生物学研究中最强大的实验技术之一 ★其本质是在体外模拟细胞内DNA分子复制的过程 美国科学家　穆利斯(K.B.Mullis) 发明了PCR技术　 1993年诺贝尔奖 PCR技术 (多聚酶链式反应) 基础知识 1.DNA的基本单位： 温故知新 脱氧核苷酸 2.脱氧核苷酸链的形成： 磷酸二酯键 A T G C A G C T 氢键 5'端 3'端 5'端 3'端 识别DNA分子的3′端与5′端： 通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端。 3.DNA分子的平面结构： 参与的组分 在DNA复制中的作用 解旋酶 DNA母链 4种脱氧核苷酸 DNA聚合酶 引物 打开DNA双链 提供DNA复制的模板 合成子链的原料 催化合成DNA子链 使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸 4.细胞内DNA复制的基本体系： 7 DNA复制参与组分 在DNA复制中的作用 PCR反应体系 解旋酶 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的模板 4种脱氧核苷酸 合成子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸 思考：体外PCR扩增DNA时，如何提供与体内DNA复制相似条件？ 变性（ 80～100℃ ） Taq DNA聚合酶（耐高温） 20～30个核苷酸构成的DNA或RNA (一)PCR的原理 DNA母链 4种脱氧核苷酸 8 变性的目的： 解开双链 复性的目的： 有利于引物1和引物2与两条单链的结合 (一)PCR的原理 1.PCR热变性原理： PCR扩增仪 PCR扩增仪实际上就是一台能够自动调控温度的仪器，它可以根据DNA的热变性原理，通过自动改变温度，达到扩增DNA片段的目的。 (一)PCR的原理 2.DNA聚合酶特性： DNA聚合酶不能从头合成D