3.2 基因工程的基本操作程序（第2课时）-【精品课堂】2021-2022学年高二生物优质课件（人教版2019选择性必修3）

第二节 基因工程的基本操作程序 1 1、植物目的基因的导入方法 2、动物目的基因的导入方法 3、微生物目的基因的导入方法 三、将目的基因导入受体细胞 （1）花粉管通道法 （2）农杆菌转化法 ①转化 ②农杆菌的特点 ③转化过程 ④受体细胞 1、植物目的基因的导入方法 （1）花粉管通道法 我国科学家独创的方法，其受体细胞为受精卵。方法如下： 方法一：用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中； 方法二：在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。 子房 花粉 柱头 花粉管 精子 卵细胞 胚囊 （2）农杆菌转化法 ①转化 转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 此处“转化”与肺炎链球菌转化实验中的“转化”含义相同，实质都是基因重组。 （2）农杆菌转化法 ②农杆菌的特点 a.能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。 b.农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 ③转化过程 T-DNA 目的基因 构建基因表达载体 含目的基因的重组Ti质粒 转入农杆菌 含重组Ti质粒的农杆菌 导入植物细胞 表现出新性状的植物 植物细胞 将目的基因插入染色体DNA中 ④受体细胞 a、体细胞。可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞，通过植物组织培养再生成植株。 b、受精卵。可以将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等。 随着转化方法的突破，用农杆菌侵染水稻、玉米等多种单子叶植物也取得了成功。 2、动物目的基因的导入方法 受体细胞为受精卵。 导入方法通常为显微注射法。 获得的重组细胞一般需要通过早期胚胎培养和胚胎移植获得个体。 3、微生物目的基因的导入方法 Ca2+处理大肠杆菌 使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞 将重组的基因表达载体导入其中 感受态细胞 吸收 1、目的与意义 2、检测与鉴定 3、小结 四、目的基因的检测与鉴定 1、目的与意义 目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与