1.2.2微生物的选择培养与计数课件2021-2022学年高二下学期生物人教版选择性必修3

纯培养物 纯培养 由单一个体繁殖所获得的微生物群体 配制培养基 灭菌 接种 分离 培养 如何从自然界中，分离出 需要的特定微生物？ 提出问题 1.2.2微生物的选择培养和计数 稀释涂布平板法呈现的杂菌群 实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 筛选原因：因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，使耐热的Taq细菌保留下来。 PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境（热泉、火山口） 一、选择培养基 热泉中发现了耐热的Taq细菌， 并分离到耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）。 根据微生物对生存环境的要求，到相应环境中去寻找。 启示： 耐寒微生物 石油分解菌 被石油污染的土壤 冰川冻土层 实验室筛选微生物原理： 人为提供__________________的条件（包括_____、_____和_____等），同时_______________________ 有利于目的菌生长 抑制或阻止其他微生物的生长 营养 温度 pH 以尿素为唯一氮源的培养基 （1）利用营养条件进行选择培养 筛选出能分解尿素的细菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 不加含碳有机物的无碳培养基 不加氮源的无氮培养基 （2）在培养基中加入某种化学物质。 分离得到酵母菌、霉菌等 加入青霉素的培养基 分离得到金黄色葡萄球菌 加入高浓度食盐的培养基 （3）改变微生物的培养条件。 厌氧型微生物，兼性厌氧型 无氧环境下培养 培养基中加氨苄青霉素 具有氨苄青霉素抗性的菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌 培养基应有菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 实例; 选择培养基的概念 在微生物学中，将允许 生长，同时 或 其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 特定种类的微生物 抑制 阻止 思考 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基 作为对照 基础培养基 选择培养基 问题：如果让你分离土壤中分解尿素的细菌，你应该怎么设计呢？ 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是一种重要的农业氮肥，尿素不能直接被农作物吸收，土壤中的细菌将尿素分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收 。 土壤中的细菌分解尿素是因为他们能合成脲酶。 CO(NH2)2 + H2O 2NH3 + CO2 脲酶 选择培养基配方的设计 尿素的立体结构 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素 的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。 2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 选择培养基配方的设计 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_______________；该类培养基的主要用途为_______________。 2.从用途上来讲，培养基二属于_____培养基，目的是为了获得_________。 3.两种培养基共有的培养基成分有：_____________________； 培养基一的碳源为_______，氮源为_______； 培养基二的碳源为_______，氮源为_______。 培养基一 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 固体 添加了凝固剂琼脂 分离、鉴定、计数 选择 能分解尿素的微生物 碳源、氮源、无机盐、水 牛肉膏 蛋白胨 葡萄糖 尿素 当堂训练 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。 （二）微生物的选择培养 如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，还需对土壤菌液进行稀释及科学的微生物数量测定方法---稀释涂布平板法。 应采用_____________； 由于土壤细菌的数量庞大，要想得到特定微生物的纯培养物，必须要对土壤进行________，然后再将菌液_____到制备好的__________上