内容正文:
第2节 动物细胞工程
一 动物细胞培养
课程内容标准
核心素养对接
1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
1.理解动物细胞培养的条件。(生命观念)
2.说出动物细胞培养的过程。(科学思维)
3.阐述干细胞培养过程及其应用。(社会责任)
[对应学生用书P35]
1.动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
2.动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
3.动物细胞培养的条件
1.过程
2.相关概念
(1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。
(2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象。
(3)原代培养:分瓶之前的细胞培养,即动物组织经处理后的初次培养。
(4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现接触抑制后,需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖的培养过程。
3.类型及影响因素
类型
影响因素
能够悬浮在培养液中生长增殖
细胞密度、有害代谢产物积累、培养液中营养物质含量
需贴附于某些基质表面才能增殖
除上述因素外,还有接触抑制
1.定义及分布:在一定条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
2.分类及功能
1.判正误
(1)制备肝细胞悬液时先用机械方法处理肝组织,再用胃蛋白酶处理。(×)
(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。(×)
(3)动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。(×)
(4)胚胎干细胞可以来源于早期胚胎,也可以来源于成熟个体。(×)
2.微思考
动物细胞培养为什么需要无菌、无毒的环境?
提示 细菌、真菌和病毒等均可造成细胞培养环境的污染,而离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力,一旦受到污染或自身代谢物质积累等,培养的细胞就会死亡。
[对应学生用书P36]
任务驱动一 动物细胞培养的条件和过程
如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据图回答:
(1)动物细胞培养时,为什么要将动物组织分散成单个细胞?
提示 ①保证细胞所需要的营养供应;②保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
(2)动物细胞培养需要控制什么样的气体环境?各自起什么作用?
提示 95%空气加5%CO2;空气中的O2维持细胞代谢,CO2维持培养液的pH。
(3)动物细胞培养和植物组织培养一样可以获得完整个体吗?
提示 动物细胞培养时细胞只进行生长和增殖,不能得到完整个体,但是植物组织培养可以获得完整个体。
1.动物细胞培养过程分析
(1)培养流程
(2) 酶处理
①用酶“两次”处理的目的:第一次使用的目的是使组织细胞分散开;第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来,便于分散后继续培养。
②使细胞分散开的原因:一是能保证细胞所需要的营养供应;二是能保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
③不能用胃蛋白酶处理:由于大多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,而胃蛋白酶发挥作用的最适pH为1.5~2.0,因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。
(3)原代培养和传代培养
①原代培养:动物组织分散后的初次培养。
②传代培养:原代培养过程中,贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶处理,然后分瓶培养(或液态细胞悬液的分瓶培养),让细胞继续增殖的过程。
(4)原代培养和传代培养:区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。
①第一次:用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理,使其分散成单个细胞后进行培养,为原代培养。
②第二次:细胞培养过程中出现接触抑制,用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来,然后,将其分散到多个培养瓶中继续培养,为传代培养。
2.动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较项目
动物细胞培养
植物组织培养
生物学原理
细胞增殖
细胞全能性
培养基性质
液体
固体
培养结果
子代细胞
新的植株
应用
是动物细胞工程的基础
(1)快速繁殖;
(2)培育作物新品种;
(3)细胞产物的工厂化生产;
(4)作物脱毒
培养条件
无菌、适宜的温度和pH
取材
新鲜的组织
植物器官、组织或细胞
培养对象
分散的单个细胞
植物器官、组织或细胞
过程
原代培养、传代培养
脱分化、再分化
细胞分裂、生长、分化特点
(1)贴壁生长;
(2)接触抑制
(1)脱分化:形成愈伤组织;
(2)再分化:形成根、芽等
3.培养条件的分析
(1)添加血清的作用:血清和血浆中含有多种维持细胞正常代谢和生长的物质,如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。细胞培养时,一般需添加10%~2