内容正文:
第2课时 微生物的选择培养和计数
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[学习目标]
1.根据微生物的代谢特征配制选择培养基。
2.掌握从土壤中分离出尿素分解菌并计数的操作过程。
3.尝试通过稀释涂布平板法纯化土壤中分解尿素的细菌。
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必备知识 自主学习
核心要点 合作探究
课堂检测 素养达标
课时作业 巩固演练
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[教材导读]
一、选择培养基
1.实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于________生长的条件
(包括营养、温度、pH等),同时___________其他微生物的生长。
2.选择培养基:在微生物学中,将允许_____种类的微生物生长,同时___________其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
目的菌
抑制或阻止
特定
抑制或阻止
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二、微生物的选择培养
1.目的:从土壤得到能分解尿素的细菌的__________。
2.方法:对土样进行充分稀释,然后将菌液涂布到制备好的_____培养基上。
纯培养物
选择
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3.稀释涂布平板法的操作过程
(1)_________稀释操作
系列梯度
1 mL
1 mL
1 mL
1 mL
1 mL
9 mL无菌水
1 mL
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(2)涂布平板操作
①取菌液:取________菌液,滴加到____________。
②涂布器灭菌:取出浸在______中的涂布器,放在______上灼烧,酒精燃尽后,______涂布器。
③涂布过程:用涂布器将菌液______地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使涂布______。
4.培养:待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板______,放入____________中培养,观察。
0.1 mL
培养基表面
酒精
火焰
冷却
均匀
均匀
倒置
恒温培养箱
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三、微生物的数量测定
1.活菌计数法:常用稀释涂布平板法。
(1)原理:当样品的________足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个______。通过统计平板上的________,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
稀释度
活菌
菌落数
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(2)操作
①为了保证结果准确,一般选择菌落数为________的平板进行计数。
②在同一稀释度下,应至少对_______平板进行重复计数,然后求出________。
(3)稀释原因:______________将直接影响平板上的菌落数目。
30~300
3个
平均值
样品的稀释度
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(4)稀释标准:通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数为__________、适于计数的平板。
(5)统计结果
①统计的菌落数往往比活菌的实际数目____。
②表示方法:一般用________而不是活菌数来表示。
30~300
少
菌落数
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2.显微镜直接计数法
(1)一种常用的、__________的测定微生物数量的方法。
(2)操作:利用特定的细菌计数板或_______________,在显微镜下观察、计数,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量,统计的结果一般是_________和_________的总和。
快速直观
血细胞计数板
活菌数
死菌数
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四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.基础知识
绝大多数微生物都能利用________,但是只有能合成______的微生物才能分解尿素。利用以_______作为唯一氮源的____________,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
葡萄糖
脲酶
尿素
选择培养基
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2.实验设计
(1)土壤取样:先铲去表层土,取距地表______ cm的土壤层,将样品装入纸袋中。
(2)样品稀释:一般选用______________________倍稀释的稀释液进行平板培养。
(3)微生物的培养与观察:一般在___________ 的温度下培养1~2 d,每隔______统计一次菌落数目,选取_____________时的记录作为结果。
3~8
1×104、1×105、1×106
30~37 ℃
24 h
菌落数目稳定
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3.操作提示
(1)将涂布器从酒精中取出时,要让____________在烧杯中滴尽,然后再放在火焰上灼烧。不要将______