内容正文:
第2节 动物细胞工程
第1课时 动物细胞培养
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[学习目标]
1.简述动物的细胞培养及条件。
2.举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。
3.关注胚胎干细胞的应用及研究进展。
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必备知识 自主学习
核心要点 合作探究
课堂检测 素养达标
课时作业 巩固演练
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[教材导读]
一、动物细胞培养的条件
1.动物细胞培养的概念
从动物体中取出相关的组织,将它分散成_________,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞___________的技术。
单个细胞
生长和增殖
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2.条件
(1)营养
①合成培养基:将细胞所需的营养物质按_____________严格配制而成。
②天然成分:______等。
③一般使用______培养基,即培养液。
种类和所需量
血清
液体
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(2)无菌、无毒的环境
①培养液和培养用具_____处理。
②______环境下操作。
③培养液定期更换的目的:清除代谢物,防止_____________________
________________。
灭菌
无菌
细胞代谢物积累对细
胞自身造成危害
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(3)温度、pH和渗透压
①哺乳动物细胞培养的温度多以____________为宜。
②多数动物细胞生存的适宜pH为_________。
③________也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。
36.5±0.5 ℃
7.2~7.4
渗透压
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(4)气体环境
①动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是__________所必需的,CO2的主要作用是__________________。
②在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有95%______和_________的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
细胞代谢
维持培养液的pH
空气
5%CO2
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二、动物细胞培养的过程
1.过程
(1)首先要对新鲜取材的动物组织进行处理,或用机械的方法,或用________________________等处理一段时间,将组织分散成单个细胞。
(2)然后,用培养液将细胞制成__________,再将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内,置于适宜环境中培养。
胰蛋白酶、胶原蛋白酶
细胞悬液
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2.体外培养的动物细胞类型
(1)能够_____在培养液中生长增殖。
(2)需要贴附于某些__________才能生长增殖。
3.细胞贴壁:需要贴附于某些__________才能生长增殖的细胞,往往贴附在培养瓶的瓶壁上的现象称为__________。
4.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会_____________的现象。
悬浮
基质表面
基质表面
细胞贴壁
停止分裂增殖
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5.原代培养:人们通常将__________的细胞培养,即动物组织经处理后的__________称为原代培养。
6.传代培养
(1)概念:人们通常将________的细胞培养称为传代培养。
(2)过程
①细胞收集:悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要重新用__________等处理,使之分散成单个细胞,然后再用________收集。
②将收集的细胞制成细胞悬液,分瓶培养。
分瓶之前
初次培养
分瓶后
胰蛋白酶
离心法
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三、干细胞培养及其应用
1.分布:存在于__________、骨髓和________等多种组织和器官中。
2.类型:胚胎干细胞和成体干细胞等。
3.胚胎干细胞:简称ES细胞,存在于__________中,具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至______的潜能。
早期胚胎
脐带血
早期胚胎
个体
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4.成体干细胞
(1)分布:__________或器官内。
(2)类型:骨髓中的______干细胞、神经系统中的_______干细胞和睾丸中的_______干细胞等。
(3)特性:一般认为,成体干细胞具有____________,只能分化成特定的细胞或组织,________发育成完整个体的能力。
成体组织
造血
神经
精原
组织特异性
不具有
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5.应用
(1)有着______