内容正文:
第二节 动物细胞工程(一)
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在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增;
目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤;
通过细胞培养构建的人造皮肤
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动物细胞工程常用技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
一、动物细胞培养技术
动物细胞培养
动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
动物细胞培养的原理
细胞增殖。
(一)动物细胞培养的条件
1、体内细胞正常生长增殖的原因
2、动物细胞培养的条件
1、体内细胞正常生长增殖的原因
动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动,有些细胞还能不断增值,是因为机体给这些细胞提供了适宜的条件,包括充足的营养、稳定的内环境等。
2、动物细胞培养的条件
(1)营养
细胞在体外培养时,培养基中应含有细胞所需的各种营养物质。
将细胞所需的将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。合成培养基一般包括糖类、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、微量元素等。
由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,因此,在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分。
培养动物细胞一般使用液体培养基,也称为培养液。
在体外培养细胞时,必须保证环境是无菌、无毒的。
需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。
培养液还需要定期更换,以便清楚代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
(2)无菌、无毒的环境
温度:哺乳动物多以36.5±0.5 ℃为宜。
pH:多数细胞适宜pH为7.2~7.4。
渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要参数,一般与细胞内液渗透压相等。
(3)温度、pH和渗透压
动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。
O2是细胞代谢所必需的; CO2维持培养液的pH。
在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶, 并将它们置于含有95%空气和5