3.1.2 DNA的粗提取和鉴定-【领航班同步备课】2021-2022学年高二生物精品课件（人教版2019选择性必修3）

第3章　基因工程 第1节 重组DNA技术的基本工具（2） 新课程标准 核心素养 1.简述重组DNA技术所需的三种基本工具及其作用。 2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 3.进行DNA的粗提取与鉴定。 1.科学思维——模拟重组DNA分子的操作过程，说出合成新DNA分子的基本原理。 2.社会责任——关注基因工程的社会议题，参与讨论基础理论和技术发展如何催生了基因工程。 复习提问： DNA重组技术的基本工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键 作用部位：磷酸二酯键 种类 E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 运载 工具 条件 结构简单,大小适中 能在宿主细胞中自我复制并稳定 存在具一个多个限制酶切位点 具标记基因 种类：质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒 DNA连 接酶 DNA的粗提取与鉴定 一、实验原理： 1．提取DNA的原理 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。 (2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。 2．鉴定DNA的原理 在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。 DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等。 不能选择哺乳动物成熟的红细胞，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体，几乎不含DNA。 二、材料用具 1.选材： 注意： 2.试剂： ①研磨液 ②体积分数为95%的酒精 ③2mol/L 的NaCl溶液 ④二苯胺试剂 ⑤蒸馏水 ——含有NaCl、EDTA、SDS、Tris和HCl ——析出DNA ——溶解DNA ——鉴定DNA，要现配现用 三、方法步骤 （视频） 1．称取约30 g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨。 2．去除滤液中的杂质 方案一 在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液 方案二 直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1 500 r/min的转速下离心5 min，再取上清液 三、方法步骤 3.DNA的析出 方案一 在上清液中加入体积相等的