内容正文:
片段连接在一起,在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,C正确;DNA 白质功能出发,通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列,进而确定相 聚合酶将单个脱氧核苷酸连接到已有的DNA单链上,形成磷酸二酯 对应的脱氧核苷酸序列,并获取基因。经表达的蛋白质,要对其进行 键,D正确。 生物功能鉴定。 例2(1)DNA双链复制(2)一段已知目的基因的核苷酸序列引物 经典真题练03基因工程 (3)受热变性引物耐高温的DNA聚合酶 解析:PCR的原理是DNA双链复制。 黑题 应用提优练 例3B解析:①将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,肠乳糖酶基因表 1.C解析:据图可知,EcoR I的酶切位点有6个碱基对.由于DNA分 达产物是乳糖酶,可分解乳糖,使乳糖含量降低,①正确:②人生长激素 子的碱基组成为A、T、G、C,则某一位点出现该序列的概率为1/4× 基因工程菌产生的生长激素属于该工程菌的次生代谢物,②错误:③蛋 1/4×1/4×1/4×1/4×1/4=1/4096,即4096≈4000个碱基对可能出 白质工程本质上属于基因工程的延伸,基因工程和蛋白质工程都需要 现一个限制酶EcoR I的酶切位点,故理论上得到DNA片段的平均 在分子水平对基因进行操作,③正确:④蛋白质工程是在深入了解蛋白 长度(碱基对)约为4000。C符合题意。故选C。 质分子的结构与功能关系的基础上进行的,它最终要达到的目的是改 2.D解析:A.增加模板DNA的量可以提高反应速度,但不能有效减 造现有蛋白质或制造新的蛋白质,满足人类的需求,④错误。综上所 少非特异性条带,A错误:BC.延长热变性的时间和延长延伸的时间 述,B符合题意。故选B。 会影响变性延伸过程,但对于复性中的配对位置影响不大,故不能有 巩固练习 效减少反应非特异性条带,B、C错误:D.非特异性产物增加的原因 1.C解析:限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并 可能是复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加(部分碱基 且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形 互补,未完全互补),故可通过提高复性的温度来减少反应非特异性 成黏性末端或平末端,因此为③;DNA聚合酶用于DNA分子的复制, 条带的产生,D正确。故选D。 能在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来,因此为④;DNA连接酶3.D解析:A.在N的α和B亚基之间加人一段连接肽,可获得热稳 能在具有相同末端的两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,因此为 定的融合型腈水合酶(N,),则N,与N,氨基酸序列有所不同,这可能 ①:解旋酶能够将DNA分子的双螺旋解开,故为②。故选C。 是影响其热稳定性的原因之一,A正确:B.蛋白质工程的作用对象是 2.D解析:①DNA连接酶能催化具有相同黏性末端的DNA片段之间 基因,即加入连接肽需要通过改造基因实现,B正确:C,N,为蛋白 磷酸二酯键的形成,进而实现连接,①正确:②DNA连接酶能催化具 质,蛋白质的合成需要经过转录和翻译两个过程,C正确;D.酶具有 有相同黏性末端的DNA片段之间连接,不能催化具有不同的黏性末 高效性,检测N,的活性时需先将其置于高温环境,再与底物充分混 端的DNA片段之间连接,②错误:③DNA连接酶能催化两个DNA片 合,D错误。故选D。 段的核苷酸之间的磷酸二酯键的形成,不能催化氢键的形成,⑧错 4.C解析:A.根据分析“引子”是一段DNA序列,彻底水解产物有磷 误:④DNA连接酶能催化的是两个DNA片段的核苷酸之间的磷酸二 酸、脱氧核糖和四种含氮碱基,共6种产物,A错误;B.由于线粒体中 酯键的形成④正确。故选D。 也含有DNA,因此设计“引子”的DNA序列信息还可以来自线粒体 3.D解析:A.RT-PCR是将RNA的逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式 DNA,B错误:C.根据题干信息“利用现代人的DNA序列设计并合 扩增(PCR)相结合的技术,都是根据碱基互补配对原则,故该技术可 成了引子”,说明设计“引子”前不需要知道古人类的DNA序列,C正 用来检测新冠病毒等RNA病毒,A正确:B.图示包括RNA的逆转录 确:D.土壤沉积物中的古人类双链DNA需要经过提取,且在体外经 过程,故该技术可用来检测组织细胞中基因的转录,B正确:C.①过 过加热解旋后,才能与“引子”结合,而不能直接与引子结合,D错误。 程为逆转录,需要的酶是逆转录酶,③过程为DNA复制,需要的酶是 故选C。 Tag酶,C正确:D.③过程中DNA先解链成单链,进行复性时温度应 5.A解析:A.木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白质类杂质,由于酶 下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结 具有专一性,不能水解DNA,过滤后在得到的滤液中加入特定试剂 合,D错误。故选D。 后容易提取出DNA相对含量