内容正文:
溶液中的溶解度先减小后增大,如C选项图所示。故选C。 12.(1)冷冻后的细胞易破碎新叶细胞分裂旺盛,细胞中DNA含量较 4.B解析:限制酶识别的核苷酸序列往往具有回文结构,切割后形成 高(2)溶解CTAB与核酸的复合物上清液CTAB与核酸的复 的黏性末端能够互补配对,图中①③能够互补,其他的不能互补,所 合物因溶解度降低而沉淀(3)NaC1RNA②95%的酒精 以①③属于同一种限制酶切割而成的,B正确,A、C、D错误。故 (4)没有设置对照组没有进行水浴加热 选B。 解析:(1)蜡梅新鲜嫩叶在液氨中更易于研磨的原因为冷冻后的细 5.B解析:A.在预冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低,DNA的 胞易破碎,而且低温下各种物质不易被降解。该实验不选用老叶而 沉淀量最大,故预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA,A正确: 用新鲜嫩叶为材料的原因是新叶细胞分裂旺盛,细胞中DNA含量 B.猪是哺乳动物,哺乳动物的成熟红细胞中没有细胞核,不含DNA, 较高。(2)由题干信息“CTAB是一种阳离子去污剂,能与核酸形成 B错误:C.DNA析出后,由于DNA是大分子物质,可将溶液倒入离 复合物,在高盐(>0.7mol/L NaCl)浓度下可溶”可知,过程①中, 心管中进行离心,弃上清液,将管底的沉淀晾干,C正确:D.在沸水浴 CTAB提取液中NaCl浓度为1.4mol/L,其目的是溶解CTAB与核酸 条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 的复合物。氯仿一异戊醇,其密度均大于水,能使蛋白质变性沉淀, DNA的试剂,D正确。故选B。 与水和DNA均不相溶,这说明过程②中加入氯仿一异戊醇离心后, 6.A解析:已知同时用酶I和酶V切割图中质粒A,产生1.8kb和 DNA主要存在于A中,则A为上清液。过程③加入异丙醇出现沉 8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),说明质粒上含有10000 淀的主要原因是CTAB与核酸的复合物因溶解度降低而沉淀。 个碱基对:如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种 (3)去除沉淀物中的RNA需要使用RNA酶使其分解,故可先用一 片段,则说明酶I和酶Ⅱ、酶Ⅱ和酶Ⅲ、酶Ⅲ和酶V切割位点间都含 定浓度的NaCI溶液溶解沉淀物,然后加人RNA酶,再重复步骤②, 有600个碱基对,那么同时用酶Ⅱ和酶V切割质粒A,则产生的片段 最后在上清液中加入冷却的、体积分数为95%的酒精,可以得到纯 有600+600=1200对碱基(酶Ⅱ、酶Ⅲ和酶V之间的碱基)和8200+ 净的DNA。(4)DNA鉴定需要沸水浴加热,并且鉴定过程中需要设 600=8800对碱基(酶Ⅳ、酶I和酶Ⅱ之间的碱基),故产生的片段有 置对照实验。 1.2kb和8.8kb。故选A。 第2节 基因工程的基本操作程序 7.C解析:①处为氢键,是解旋酶的作用部位:②处为磷酸二酯键,是 限制性内切核酸酶的作用部位;③处为两个DNA片段的缺口,是 黑题 应用提优练 DNA连接酶的作用部位。综上所述,C正确,A、B、D错误。故选C。 1.A解析:目的基因主要指编码蛋白质的基因,A错误:目的基因的筛 8.D解析:A.结合题意可知,Cas9蛋白可对特定的DNA序列进行切 选与获取是实施基因工程的第一步,B正确;来自苏云金杆菌的B基 割,具有限制酶的特性,A正确;B.向导RNA对目标DNA进行序列 因可作为培育转基因抗虫棉用到的目的基因,C正确:随着测序技术 识别,从而实现Cas9蛋白对DNA分子的定位,这依赖于碱基对间遵 的发展,以及序列数据库和序列比对工具等的应用,越来越多的基因 循碱基互补配对原则,B正确:C.RNA引导Cas9蛋白到一个特定的 的结构和功能为人们所知,这为科学家找到合适的目的基因提供了 基因位点对特定的DNA序列进行切割,不同的目的基因中可能含有 更多的机会和可能,D正确。 相同的碱基序列能被该复合物识别,故对不同目标基因进行编辑时 2.C解析:DNA分子的体外复制和体内复制都遵循碱基互补配对原 可能使用相同的Cas9蛋白和向导RNA,C正确:D.Cas9蛋白相当于 则,A正确:PCR技术是在较高温度条件下进行的,因此PCR与细胞 限制酶,其切割的位点是磷酸二酯键,D错误。故选D。 内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高,B正确:PCR技术是在 9.D解析:A.EcoR I、PstI两种酶切割后,都会形成黏性末端,而 较高温度条件下打开双链后进行扩增的,不是边解旋边复制的,C错 E.coli DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端的DNA片段,A正确; 误;DNA复制方式都是半保留复制,D正确。 B.SmaI、EcoR V两种酶切割后形成的是平末端,而T4DNA连接酶 3.D解析:目的基因导人受体细胞前必须进行基因