1.2 微生物的选择培养和计数（2）-导学案-2021-2022学年高二生物人教版（2019）选择性必修3

高二生物导学案 第1章 第2节 　微生物的选择培养和计数 （2） 班级 姓名 【学习目标】1.阐明微生物选择培养的原理。2.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【预习案】 一．选择培养基、微生物的选择培养和数量测定 1．选择培养基 (1)自然界中目的菌的筛选 ①实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的 中提取出来的。 ②依据：水生栖热菌能在 的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 (2)实验室中目的菌的筛选 ①原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时 其他微生物的生长。 ②方法：利用选择培养基分离。 选择培养基：允许 的微生物生长，同时 其他种类微生物生长的培养基。 2．微生物的选择培养 (1)方法：对样品进行充分稀释，然后将 涂布到制备好的 培养基上。 (2)稀释涂布平板法的操作过程 ①系列稀释操作 a．编号为1×102～1×107试管中分别盛有9 mL 。 b．将 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。 c．取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 ②涂布平板操作 取菌液：取0.1 mL菌液，滴加到 表面 ↓ 涂布器消毒：将涂布器浸在盛有 的烧杯中 ↓ 涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器 后，再进行涂布 ↓ 涂布平板：用涂布器将 均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 (3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板 ，放入 中培养1～2 d。 3．微生物的数量测定 (1)稀释涂布平板法 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少 。 ②计数原则：一般选择菌落数为 的平板进行计数。样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养。在一同稀释度下，应至少对 个平板进行重复计数，然后求出 。 ③注意事项：统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 菌落。因此，统计结果一般用 而不是用活菌数来表示。 (2)显微镜直接计数法 一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量， 统计的结果一般是 的总和。 【探究案】 1．通常1 g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中，细菌的数量最多，能分解尿素的细菌是其中的一部分。如何设计培养基的配方，从而将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 2．用平板划线法接种培养结果的图片如下。请结合图片分析，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？ 3．当菌液稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于一个活菌。用稀释涂布平板法接种培养结果的图片如下。与平板划线法相比，为什么稀释涂布平板法可以用于细菌的计数？ 4．请计算：4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为 个。 5． 通过稀释涂布平板法统计的细菌的数目与它的实际数目相同吗？ 6． 对稀释涂布平板法和显微镜直接计数法进行比较 项目 显微镜直接计数法 稀释涂布平板法 主要用具 显微镜、 等 培养基等 计数依据 菌株本身 培养基上的 数 优点 计数方便、操作简单 计数的都是活菌 缺点 死菌、活菌都计数在内 操作复杂、有一定误差 【检测案】 1.判断正误,并说明理由 (　　)(1)选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物的生长(　　)(2)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基 (　　)(3)脲酶能催化尿素分解产生N2，N2可作为细菌生长的氮源 2.选择题 (　　)1.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是 A．实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液 B．分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的