内容正文:
高二生物导学案
第1章 第2节 微生物的选择培养和计数 (3)
班级 姓名
【学习目标】1.阐明微生物选择培养的原理。2.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。
【预习案】
一.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.实验设计
(1)土壤取样
①土壤要求:酸碱度接近中性且潮湿。
②取样部位:距地表约 的土壤层。
(2)样品的稀释
测定土壤中细菌的数量,一般选用 倍稀释的稀释液进行平板培养,当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放宽一点。
(3)微生物的培养与观察
①培养:根据不同微生物的需要,控制适宜的培养温度和培养时间。细菌一般在 ℃的温度下培养 d。
②观察
a.观察方法:每隔 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b.记录菌落的特征:包括菌落的 、 和 等。
2.操作提示
(1)无菌操作
①取土样的用具在使用前都需要 。
②实验操作均应在 进行。
(2)做好标记:本实验使用的平板和试管较多,为避免混淆,最好在使用前做好标记。例如,在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的 等。
(3)制定计划:对于耗时较长的生物实验,需要事先规划时间,以便提高 ,在操作时有条不紊。
【探究案】
1.甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果。
(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230,该同学的统计结果 (填“可靠”或“不可靠”),若不可靠,应如何改进?
(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,该同学将21舍去,然后取平均值。该同学对实验结果的处理 (填“合理”或“不合理”)。微生物计数时,如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况,应 ,找出差异的原因,而不能简单地将结果舍弃后进行计数。
2.尝试完成下表中对微生物的分离与计数实验结果的分析。
目的
现象
结论
是否有杂
菌污染的
判断
未被杂菌污染
培养物中菌落数偏高
被杂菌污染
培养物中菌落形态多样,菌落数偏高
培养物中混入其他杂菌
选择培养
基是否起
筛选作用
牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目
选择培养基 筛选作用
3.利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物都是能分解尿素的微生物吗?
【检测案】
1.判断正误,并说明理由
( )(1)稀释涂布平板法能分离细菌,也能计数
( )(2)测定不同微生物数量时,接种的土壤稀释液的稀释度相同
( )(3)菌落特征是鉴别菌种的重要依据
( )(4)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量
2.选择题
( )1.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述,错误的是( )
A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度
B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
C.该实验应采用稀释涂布平板法
D.用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红
( )2.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果,其中正确的是( )
A.涂布了1个平板,统计的菌落数是230
B.涂布了2个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238
C.涂布了3个平板,统计的菌落数分别是13、234和254,取平均值167
D.涂布了3个平板,统计的菌落数分别为210、240和250,取平均值233
核心归纳
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需注意的问题
(1)为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
(2)恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。
(3)为增强实验说服力与准确性,设计实验时,需要涂布至少三个平板作为重复组,目的是排除实验中偶然因素对实验结果的影响。
(4)分析实验结果时,要考虑重复组结果是否接近,如果相差太大,意味着操作有误,需重新实验。
(5)为防止培养时间不足导致菌落遗漏,在菌落计数时,每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
(6)统计的菌落数目往往比活菌实际数目低。
第1章 第2节 微生物的选择培养和计数