1.2 微生物的培养技术与应用（第四课时）-【名校同步】2021-2022学年高二生物精品课件（人教版2019选择性必修3）

第1章第2节 微生物的培养技术与应用（第4课时） Copyright © 2022 liqionghua 版权申明：本课件为著作人原创作品，未经著作人授权不得擅自抄袭转载摘编或用于商业用途 小沫高中生物课堂 【提出问题】 1.土壤中含有能分解尿素的细菌，我们如何和分离它们？ 2.每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌？ 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 【实验原理】 绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌，该选择培养基的配方如下。 组分 含量 KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4∙7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g H2O 定容至1000mL 提供无机盐 提供碳源 提供氮源 提供水 可判断为固体培养基 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 【实验设计流程】 土壤取样 ①要求：富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤 ②取样土层：距地表3~8cm的土壤层 制备培养基 以尿素为唯一氮源（选择培养基） 样品的稀释 在酒精灯火焰旁称取土壤10g，放入90mL无菌水的锥形瓶中，震荡使土壤与水充分混合，将细菌分散，制成101倍土壤稀释液。用1支1mL无菌吸管从中吸取1mL土壤悬液注入盛有9mL无菌水的试管中，吸取三次，充分混匀，制成102倍的土壤稀释液。以此类推，制成103、104、105、106、107倍的土壤稀释液。 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 【实验设计流程】 涂布平板 培养与观察 图中的1、2、3平板是选择培养基，4平板为牛肉膏蛋白胨培养基，以判断选择培养基是否具有筛选作用；另外，还要有两个对照，即不涂布稀释液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基以验证培养基中是否含有杂菌。 1 2 3 4 将平板倒置于30~37℃的恒温培养箱中培养1~2天。每隔24小时统计一次菌落数目 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 菌落计数 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数，同一稀释度下至少计数3个平板，求出平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。设计如下表格记录并计数。 稀释度 104 105 106 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 每个平板的菌落数 【实验设计流程】 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 菌落计数 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数，同一稀释度下至少计数3个平板，求出平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。设计如下表格记录并计数。 【实验设计流程】 稀释度 菌落形状 菌落大小 菌落颜色 平均值 104 105 106 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 【结果分析与评价】 内容 现象 结论 有无杂菌污染的判断 空白对照的培养基中无菌落生长 培养基中菌落数偏高 菌落形态多样，菌落数偏高 选择培养基的筛选作用 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目多于选择培养基上的数目 样品的稀释操作 得到2个或2个以上菌落数目在30~300的平板 重复组的结果 未被杂菌污染 被杂菌污染 混入其他氮源 选择培养基具有筛选作用 操作成功 若选取同一种土样，统计结果应相近 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 探究实践 【实验视频】 本节小结 一、概念检测 1. 研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，判断下列相关表述是否正确。 （1）这种培养基是一种选择培养基。（ ） （2）利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤。（ ） （3）相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌。（ ） 练习与应用 √ √ √ 2. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ） A. 菌落中的细菌数目是固定的 B. 平板上的一个菌落就是一个细菌 C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌 练习与应用 D 练习与应用 二、拓展应用 1. 反刍动物，如牛和羊，具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。请你设计一个实验，从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物。 提示：反刍动物的瘤胃中有大量的微生物，其中就有分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基，还应该参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。 练习与应用 2. 地球上的植物每