内容正文:
第1章第2节
微生物的选择培养和计数(第一课时)
Copyright © 2022 liqionghua
版权申明:本课件为著作人原创作品,未经著作人授权不得擅自抄袭转载摘编或用于商业用途
小沫高中生物课堂
从社会中来
根据醋酸菌生长繁殖的适宜温度为28℃-33℃、最适pH为3.5-6.5、、对酒精的耐受力颇高等条件筛选出醋酸菌。在工厂,为了提高产量和质量,避免杂菌污染,一般采用人工纯接种的方式进行发酵。由于醋酸菌种类不同,其对酒精的氧化能力也有差异。在实际生产中,选择菌种是很重要的工作,最好选用氧化酒精速度快、不再分解醋酸、耐酸性强、产品风味好的菌种。
传统工艺酿醋利用的是自然界中的野生菌种,涉及的微生物种类繁多,其中醋酸菌是决定食醋产量和质量的主要菌种。为满足食醋产量需求、缩短发酵周期,现代工业制醋一般采用人工选育的纯培养的醋酸菌进行乙酸发酵。
如何从多种微生物中分离出优良的醋酸菌,进而完成纯培养呢?
2
目录
Contents
1
选择培养基
2
微生物的选择培养
3
微生物的数量测定
3
1
选择培养基
【 任务一】分离特定种类的微生物
【资料1】耐热DNA 聚合酶(Taq DNA 聚合酶):1969年人们从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离出一种嗜热的水生栖热菌yT1株分离提取出,能在70~ 75C生长,从该菌分离纯化得到一种耐热的、依赖DNA 的DNA 聚合酶,简称Taq DNA 聚合酶。
1
选择培养基
筛选水生栖热菌的条件是什么?为什么这个条件能让水生栖热菌“脱颖而出”?
你还知道哪些条件能影响微生物的生存?
这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示?
水生栖热菌能适应高温环境,而绝大多数微生物在高温下不能生存。
人为提供有利于目的菌生长的条件(营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。例如,必修二开展的“探究抗生素对细菌的选择作用”活动中,在添加抗生素的培养基中只有耐药菌可以存活。
特殊营养物质、pH、O2等。
【 任务一】分离特定种类的微生物
1
选择培养基
那什么是选择培养基呢?
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
1
选择培养基
思考
选择培养基配方的设计
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质相对稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,NH3再转化为NO-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可作为细菌生长的氮源。
CO(NH2)
脲酶
+ H2O
+ CO2
2NH3
NO-、NH4+
被植物吸收
尿素分子模型
1
选择培养基
讨论
1.如果让你配置一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
培养基的配方中也应含有微生物生长所需的营养要素:碳源、氮源、水、无机盐等。但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。
2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
这种培养基与普通培养基相比,只是用尿素作为唯一氮源,培养基的其他营养成分基本相同。
你想知道1g土壤中,有多少能分解尿素的细菌吗?
仅有选择培养基可以了吗?
2
微生物的选择培养
【 任务二】对细菌进行计数
【资料1】 通常1g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物,其中,细菌的 数量最多,能分解尿素的细菌是其中一部分,如图1。
【资料2】土壤溶液直接接种到选择培养基上的培养,结果如图2。
图1完全培养基
图2选择培养基
可否直接制备土壤溶液,接种到选择培养基上进行培养?
×
2
微生物的选择培养
【资料3】当菌液稀释倍数足够高时,培养基表面生长的一个单菌落来源于一个活菌。
【 任务二】对细菌进行计数
稀释104倍
稀释105倍
稀释106倍
稀释107倍
2
微生物的选择培养
【资料4】
【 任务二】对细菌进行计数
平板划线法
用平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的吗?为什么?
×
2
微生物的选择培养
【资料4】观看稀释涂布平板法操作视频,您能简述操作步骤吗?
【小结:稀释涂布平板法】
(1)概念:将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够大的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。
微生物培养的条件:
30~37℃的恒温培养箱中培养1~2天。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。
【小结:稀释涂布平板法】
(2)梯度稀释操作
①将分别盛有9mL无菌水的6支试管按102~107的顺序编号;
②用移液管吸取1mL锥形瓶中稀释10倍的菌液,注入102倍稀释的