内容正文:
第1章第2节
微生物的基本培养技术(第二课时)
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小沫高中生物课堂
目录
Contents
1
培养基的配制
2
无菌技术
3
微生物的纯培养
3
微生物的纯培养
纯培养物:
纯培养:
培养物:
将接种于培养基内,在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体称为培养物。
有单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。
获得纯培养物的过程就是纯培养。
配置培养基
灭菌
倒平板
接种和分离
培养
操作步骤:
念珠菌显色培养基
大肠杆菌培养基
酵母菌培养基
金黄色葡萄球菌和枯草杆菌培养基
3
微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
菌落:
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。
微生物的常用接种方法:
____________和_________________。
平板划线法
单独菌落:
由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
稀释涂布平板法
3
微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
目的要求:
1.学会配置培养酵母菌的培养基并倒平板。
2.学会进行无菌操作。
3.尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。
材料用具:
酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸)、皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。
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微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
方法步骤:
称取去皮的马铃薯200g,切成小块,加入1000ml,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15~20g琼脂,用蒸馏水定容至1000mL。
①配置培养基
②灭菌
将配置好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100kPa、温度为121℃的条件下,灭菌15~30min。将5~8套培养皿包成一包,用几层牛皮纸包紧,放入干热灭菌箱内,在160~170℃灭菌2h。
能避免因水蒸气凝结而浸湿棉塞;在取出盛有培养基的锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌的作用。
3
微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
配置培养基
灭菌
方法步骤:
3
微生物的纯培养
倒平板
方法步骤:
待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰旁附近倒平板。倒平板的具体操作步骤如下。
通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
不要完全打开,以免杂菌污染培养基
既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染,又可以使培养基中的水分较快地蒸发。
琼脂是一种多糖,在98℃以上熔化,在44℃以下凝固,倒平板时高于50℃会烫手,低于50℃时,若不及时操作,琼脂会凝固。
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微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
配置培养基
灭菌
方法步骤:
倒平板
3
微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
在倒平板的过程中,若不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
不能,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
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微生物的纯培养
【探究和实践】 酵母菌的纯培养
接种和分离
方法步骤:
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养,可以分离得到单菌落。
3
微生物的纯培养
①每次划线的菌液均来自 ,能使细菌数目随划线次数的 而逐渐 ,最终得到由 繁殖而来的菌落。
②最后一区不可与 相连,不然将得不到单独的菌落;
③每次划线,均要 接种环,冷却的目的是 。
注意事项
上次划线的末端
增加
减少
单个细菌
第一区
灼烧并冷却
防止温度太高杀死菌种
接种和分离
方法步骤:
3
微生物的纯培养
灼烧的目的
灼烧的顺序 目的
第一次灼烧
每次划线之前灼烧
划线结束灼烧
避免杂菌的污染
杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种来自上次划线末端
杀死残留菌种,避免污染环境、感染操作者
接种和分离
方法步骤:
3
微生物的纯培养
接种方法:
平板划线法
找不到接种酵母菌的平板划线法视频,将就看一下大肠杆菌的平板划线法
完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24~48h。
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