内容正文:
基因工程简介
第三章 第四节
巩固提问
上图中的S、O、P、R序列分别代表什么基因?具有什么作用?操纵子由哪些基因构成?
S:结构基因 O:操纵基因
P:启动子 R:调节基因
操纵子由结构基因、操纵基因、启动子和调节基因构成
R
P
S
O
lacZ
lacY
lacA
预习提问
真核生物的基因表达调控比原核生物复杂的原因是什么?
1)必须对转录产生的mRNA进行加工
2)转录和翻译在时间和空间上有分隔
3)某些基因只能特异地在某些细胞中表达
(细胞分化)
一 基因工程的基本内容
主要内容
1)基因工程的概念
2)基因操作的工具
3)基因操作的基本步骤
什么叫基因工程?
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。学科网 zxxk
(一)基因工程的概念
(一)基因工程的概念
基因拼接技术或DNA重组技术
生物体外
基因
DNA分子水平
人类需要的基因产物
剪切
→ 拼接
→ 导入
→ 表达
实质
基因重组
基因工程的别名
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
结果
基因工程培育抗虫棉的简要过程:
(一)基因工程的概念
普通棉花(无抗虫特性)
苏云金芽孢杆菌组卷网
提取
抗虫基因
与运载体DNA拼接
导入
棉花细胞(含抗虫基因)
棉花植株(有抗虫特性)
上述培育抗虫棉的关键步骤是什么?
(一)基因工程的概念
基因工程培育抗虫棉的关键步骤:
关键步骤一:
抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来
关键步骤二:
抗虫基因与运载体DNA连接
关键步骤三:
抗虫基因导入受体(棉花)细胞
解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?
(二)基因操作的工具
关键步骤一的工具:
关键步骤二的工具:
关键步骤三的工具:
基因的剪刀——限制性内切酶
基因的针线——DNA连接酶
基因的运载工具——运载体
基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)
(二)基因操作的工具
限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶,能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。
特点:特异性。
即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。
基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)
(二)基因操作的工具
大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。
限制酶
基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶)
(二)基因操作的工具
限制酶
什么叫黏性末端?
(二)基因操作的工具
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?
(二)基因操作的工具
要切两个切口,产生四个黏性末端。
如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢?
会产生相同的黏性末端,然后让两者的黏性末端黏合起来,就似乎可以合成重组的DNA分子了。
基因的针线——DNA连接酶
(二)基因操作的工具
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。
外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)?
(二)基因操作的工具
导入过程需要运输工具——运载体。
运载体的作用有哪些?
作用一:作为运载工具,将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。
作用二:利用运载体在受体细胞(棉花细胞)内,对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。
作为运载体必须具备哪些条件?
(二)基因操作的工具
1)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2)具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。
3)具有某些标记基因,便于进行筛选。
如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。
基因的运载工具——运载体:
(二)基因操作的工具
常用的运载体主要有两类:
1)细菌细胞质的质粒
2)噬菌体或某些动植物病毒
质粒:
(二)基因操作的工具
质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中核区外的DNA分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中核以外的DNA分子。
质粒是基因工程最常用的运载体。