内容正文:
1
目标:
1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养。
2.明微生物选择培养的原理。
3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。
微生物的选择培养和计数
一、选择培养基
1.实验室中微生物的筛选原理:
人为提供______________ _的条件(包括_____、_____和_____等),同时_______________________
有利于目的菌生长
抑制或阻止其他微生物的生长
温度
营养
pH
结果:培养一定时间后,该菌数量上升
培养基中加氨苄青霉素
培养基应有菌落
没有氨苄青霉素抗性的细菌被淘汰
加入青霉素:
不加氮源:
不加含碳有机物:
——分离出酵母菌、霉菌等真菌
(青霉素能杀死细菌、放线菌)
——分离出固氮菌
——分离出自养型微生物
补充资料1-几种选择培养基举例
选择培养的三种方法:
(1)利用添加某种化学物质进行选择培养
(2)利用营养缺陷进行选择培养
(3)利用改变培养条件进行选择培养
二、微生物的选择培养
2.实验的具体操作:
2)土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。
取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌
1)制备培养基:
制备以尿素为唯一氮源的选择培养基
1.稀释涂布平板法
是将菌液进行充分稀释,然后将菌液涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
6支试管,分别加入9ml无菌水
1ml
102
1ml
103
1ml
104
1ml
105
1ml
106
1ml
107
3)样品等比稀释:
稀释10倍菌液
101
土壤10g
1.将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中
滴
2.取少量稀释液(0.1ml ),滴加到培养基表面
灼
3.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8-10s。
涂
4.用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀
浸
取样涂布平板:
放入37℃恒温箱中培养1~2d
5)培养与观察
稀释
103倍
稀释104倍
稀释
105倍
空白
对照
恒温培养箱
思考题
方法
纯化原理
接种工具
单菌落的获得
用途
接种效果图
相同点
通过连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散
将菌液进行一系列的等比稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养