内容正文:
第02讲 植物细胞工程
【学习目标】
1. 植物组织培养的过程。
2. 植物体细胞杂交技术。
3. 植物细胞工程的应用。
【基础知识】
细胞工程: 细胞工程是指应用细胞生物学 、分子生物学 和发育生物学 等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得 特定的细胞、组织、器官、个体 或其产品的一门综合性生物工程。
1.原理和方法: 生物学和 生物学。
2.操作水平: 水平或 水平。
3.目的:按照人的意愿来改变细胞内的 或获得 。
一、植物细胞工程的基本技术
1. 细胞的全能性:细胞经_分裂_和_分化_后,仍然具有_产生完整生物体_或__分化成其他各种细胞__的_潜能_,即细胞具有_全能性_。
2. 细胞具有全能性的原因(物质基础)
生物体的细胞中都含有该物种的全套遗传物质_,都有_发育成为完整个体所需的全部遗传信息_。
1. 生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因(不离体的细胞无法表现出全能性的原因)
2. 全能性大小比较
(1)受精卵、体细胞、生殖细胞
__受精卵>生殖细胞>体细胞____
(2)分化程度高的细胞、分化程度低的细胞
__分化程度低的细胞>分化程度高的细胞_____
(3)分裂能力强的细胞、分裂能力弱的细胞
__分裂能力强的细胞>分裂能力弱的细胞____
(4)植物细胞、动物细胞
__植物细胞>动物细胞__________
(5)幼嫩的细胞、衰老的细胞
__幼嫩的细胞>衰老的细胞____
(一)植物组织培养技术
1. 概念:植物组织培养是指将_离体_的植物_器官__、_组织_或_细胞_(称为_外植体_)等,培养在人工配制的_培养基_上,给予_适宜的培养条件_,诱导其形成__完整植株_的技术。
2. 原理:__植物细胞的全能性__
3. 生殖方式:_无性生殖__
4. 分裂方式:__有丝分裂__
5. 过程:
脱分化:在一定的_激素_和_营养_等条件的_诱导_下,_已经分化_的细胞_失去其特有的结构和功能__,转变成_未分化的细胞__的过程。
再分化:_愈伤组织_能重新_分化_成_芽、根等器官_的过程。
探究.实践:菊花的组织培养
(1)原理
①植物细胞一般具有_全能性__;
②在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞可以经过_脱分化_和__再分化__,形成_胚状体__,长出__芽和根_,进而发育成_完整的植株_;
③植物激素中_生长素_和__细胞分裂素_是启动_细胞分裂_、_脱分化__和_再分化_的关键激素,它们的_浓度_、_比例_等都会影响植物细胞的发育方向。
生长素用量与细胞分裂素用来的比值
结果
比值高
有利于根的分化,抑制芽的形成
比值低
有利于芽的分化,抑制根的形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
(2)材料用具
①外植体:_幼嫩的菊花茎段__:经常选择根尖(分生区)、茎的韧皮部(形成层)等分裂能力强、分化程度低的区域作为材料,容易诱导形成愈伤组织。
②体积分数为70%的酒精:对手、超净工作台、外植体进行消毒。
③质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液:对外植体进行消毒。
④无菌水:清洗外植体。
⑤培养基:包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氨基酸、维生素等)、特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素)。
(3)方法步骤
①消毒—②外植体切段—③接种—④脱分化—⑤再分化—⑥移栽培养
6.植物组织培养中细胞表现出全能性的条件
(1)离体 (最关键);
(2)严格的无菌条件 ;
(3)适宜的培养条件;
(4)适宜 浓度和比例 的激素;
(5)一定的营养条件;
(二)、植物体细胞杂交技术
1.概念:植物体细胞杂交是指将__不同来源_的_植物体细胞_,在一定条件下_融合_成__杂种细胞__,并把__杂种细胞__培育成_新植物体_的技术;
2.原理:__植物细胞的全能性、细胞膜具有一定的流动性__
3.生殖方式:_无性生殖_
4.分裂方式:__有丝分裂__
5.可遗传变异类型:_染色体(数目)变异__
6.意义:__打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种__
8.过程:
―→―→―→―→
(1)去除细胞壁
①去壁原因:_细胞壁阻碍着细胞间的杂交__
②方法:_酶解法_
③所用酶:_纤维素酶和果胶酶__
(2)原生质体间的融合
①原理:__细胞膜具有一定的流动性_
②方法:物理法:_电融合法、离心法__;化学法; 聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法 。
(3)再生出新的细胞壁
再生出新的细胞壁