内容正文:
第一章 发酵工程
第3节 发酵工程及其应用
一、发酵工程的基本环节
1.发酵工程的基本环节:菌种的选育,扩大培养,培养基的配制、灭菌,接种,发酵罐内发酵,产品分离、提纯等方面。(P22)
2.选育菌种目的:获得性状优良的菌种。(P22)
3.选育方法(菌种来源):可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。(P22)
4.菌种选育的重要性(意义):优良的菌种不仅具有健壮,不易退化,其发酵产品的产量高、质量稳定等优点,它往往还会赋予发酵产品独特的风味,因此菌种选育环节在很大程度上决定了生物发酵产物的成败。
5.扩大培养:(1)目的:获得更多的菌种。
(2)原因:工业发酵罐的体积一般较大,因此,需要接入的菌种总体积大(数目多)。(P22)
(3)扩大培养的培养基:一般为液体培养基。
6.配制培养基的要求:
(1)在菌种确定之后,(结合菌种代谢特点)选择原料制备培养基。
(2)在生产实践中,培养基的配方要经过反复试验才能确定。(即不断优化培养基)(P23)
7.培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌原因:发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种。一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。(P23)
8.灭菌目的:避免因杂菌污染而影响产品的品质和产量。
9.接种:扩大培养的菌种和灭菌后的培养基加入发酵罐中。大型发酵罐有计算机控制系统,能对发酵过程中的温度、pH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行监测和控制。(P23)
10.发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。(P23)
11.发酵罐内发酵严格控制发酵条件的原因:
(1)环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且影响微生物代谢物的形成;
(2)严格控制发酵条件,有利于使发酵全过程处于最佳状态。
12.发酵罐内发酵要求:在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分,要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。(P23)
13.不同发酵条件的影响实例——谷氨酸发酵
(1)在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸。(P23)
(2)在酸性条件下则容易生成谷氨酰胺和N-乙酰谷胺酰胺。(P23)
14.发酵容器:发酵罐。
发酵罐结构和用途
(1)培养物或营养物质的加入口、放料管、阀门:制培养物以一定速度进入、流出发酵罐,实现连续培养。
(2)空气入口:控制溶解氧。
(3)观察孔、取样管、pH计、生物传感器装置、温度传感器和控制装置:通过肉眼观察、仪器检测等监控发酵条件以及发酵过程,取样管处抽取样品进一步检测。
(4)冷却水进入口、冷却水排出口:通过控制冷水流速调节罐温。
(5)排气管:调节罐压。
(6)电动机、搅拌叶轮:电机带动叶轮转动进行搅拌,使微生物与发酵液混合均匀,加快氧气溶解以及散热。
15.现代发酵工程使用的发酵罐的优点:均有计算机控制系统,能对发酵过程中的温度、pH、溶氧量、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行监测和控制,还可以进行反馈控制,使发酵全过程处于最佳状态。(P23)
16.产品的分离、提纯的目的:获得产品。
17.产品的两种形式:微生物细胞本身、代谢物。(P23)
18.分离、提纯产物采取手段:如果发酵产品是微生物细胞本身,可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥得到产品。如果产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。(P23)
19.微生物菌种资源丰富,选择发酵工程用菌时,需要考虑哪些因素?(P23)
(1)在低成本的培养基上能迅速生长繁殖。
(2)生产所需代谢物的产量高。
(3)发酵条件易控制。
(4)菌种不易变异,退化等。
20.怎样对发酵条件进行调控以满足微生物的生长需要?(P23)
(1)反复试验确定培养基的配方;
(2)对培养基和发酵设备进行严格的灭菌;
(3)随时检测培养液中微生物的数量、产物浓度等;
(4)及时添加必需的营养组分;
(5)严格控制温度、pH和溶氧量等发酵条件,使用计算机控制系统对各种条件进行监测和控制,以及反馈控制。
21.在产物分离和提纯方面,发酵工程与传统发酵技术相比有哪些改进之处?(P23)
传统发酵技术获得的产物一般不是单一的组分,而是成分复杂的混合物,很多时候不会再对产物进行分离和提纯处理,或者仅采用简单的沉淀、过滤等方法来分离提纯产物。发酵工程中使用的分离和提纯产物的方法较多。在产物的初分离阶段,常采用沉淀、萃取、膜分离、吸附或离子交换等方法;在进一步纯化阶段,会采用液相层析法、结晶法等方法。发酵工程产物无论是代谢物还是菌体本身,都需要进行质量检查,合格后才能成为正式产品。
22.在进行发酵生产时,排出的气体和废弃培养液等能直接排放到外界环境中吗?为什么?(P23)
不能;因为在进行发酵生产时,微生物及其代谢物中都可能