内容正文:
温故知新提问
1.基因工程的概念?又名?原理?操作水平?优点?
2.重组DNA技术的基本工具?工具酶?
3.限制酶的来源?本质? 作用?作用的化学键?结果?
4.DNA连接酶的本质?作用?作用的化学键?种类?
各种类的不同(来源,作用)?
5.一个基因从DNA分子上切下来,需要切 处,产生 个黏性末端,
断 个磷酸二酯键,需要 个水。
6.DNA连接酶与DNA聚合酶的比较:相同点?不同点(模板,作用过程)?
7.载体的本质?种类?作为载体需要的条件?
8.什么是质粒?
9.DNA粗提取的原理?鉴定的原理?方法步骤
第2节 基因工程的基本操作过程
1.阐明基因工程的原理和基本操作程序
2.针对人类生产或生活中的某一需求,选取适当的基因工程的技术和方法,尝试设计获得某一转基因产品的方案。
3.尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。
复习目标
1.基因工程的操作步骤?核心?
2.目的基因?筛选目的基因有效的方法之一?
3.获取目的基因的方法?常用的方法?
4.PCR的全称?概念?原理?条件?过程(具体)?引物的作用
5.基因表达载体构建的目的?过程?
6.基因表达载体的组成包括?
启动子的本质、位置、功能?终止子的本质、位置、功能?
7.转化的概念?目的基因导入动物 细胞,方法是?
目的基因导入微生物细胞时,如何处理细胞?目的?
目的基因导入植物细胞常用的方法?
8.农杆菌转化法的原理?目的基因的插入位置?农杆菌转化法的过程?
9.目的基因检测与鉴定:哪两个水平?分子水平要检测什么,各用方法?
基础知识提问
目的基因的筛选与获取
基因表达载体的构建
将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
有了目的基因,我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可进行遗传、表达和发挥作用。
载体进入受体细胞稳定表达,才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。
才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。
基因工程的基本操作程序(四步走)
4
从基因文库中寻找
聚合酶链式反应(PCR)扩增
目的基因的核苷酸序列未知
目的基因的核苷酸序列已知
(一)目的基因的筛选与获取
方法:PCR和从基因文库中获取目的基因
5
利用PCR获取和扩增目的基因
PCR是聚合酶链式反应的缩写,在体外提供参与DNA