第1节 重组DNA技术的基本工具-备战2022年高考生物选修知识精讲（人教版2019选择性必修3）

20．人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。 （1）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是 　 　，在R末端添加的序列所对应的限制酶是 　 　。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要 　 　种酶。 考点： 限制酶的选择和启动子功能 启动子的方向 研究启动子的方法 限制酶的选择 2021年山东 （2）将构建的载体导入除去BCL11A基因的受体细胞，成功转化后，含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是 　 （3）向培养液中添加适量的雌激素，含F1～F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F5～F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A蛋白结合位点位于 　 　，理由是 　 　。 启动子的调控 19．水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将 能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻，实现了对直链淀粉合成酶基因（Wx基因） 启动子序列的定点编辑，从而获得了3个突变品系。 （1）将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需的酶是　 　，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为　 　。 （2）根据启动子的作用推测，Wx基因启动子序列的改变影响了　 ，从而 改变了Wx基因的转录水平。与野生型水稻