2022届高三一轮复习生物讲义：第5讲微生物的培养技术及应用

微生物的培养技术及应用 入门测 1．（2020·辛集市第一中学月考）培养基的配制需要运用灭菌技术。下列关于灭菌的叙述中，正确的是（ ） A．杀死一定环境中的所有细菌 B．杀死一定环境中的所有的有害细菌 C．杀死一定环境中的所有微生物 D．杀死一定环境中的所有微生物的细胞 2．（2019·山东历下·济南一中高二期中）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( ) A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板 D．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 3．（2019·山东罗庄·高二期末）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ） A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上 4．（2019·山东历下·济南一中高二期中）判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是（ ） A．不接种的选择培养基 B．接种的选择培养基 C．接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D．不接种的牛肉膏蛋白胨培养基 5．（2018·山东师范大学附中高二期中）测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（ ） A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释 C．细菌在土壤中数量比真菌多 D．随机的，没有原因 课堂讲义 考点一：微生物的基本培养技术 知识点梳理 一、培养基的配制 1．培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．培养基的种类 3．培养基的营养组成 各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。 营养物质 作用 功能 主要来源 碳源 能为微生物代谢提供碳元素 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质 无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、脂质、蛋白质、有机酸等 氮源 能为微生物的代谢提供氮元素 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 水 是生命活动所必需的 不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定 外界摄入 无机盐 为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素，包括大量元素 细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂 无机化合物 二、无菌技术 1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。 2．消毒和灭菌 消毒：使用较为温和的物理、化学或生物等方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物。常用方法： 煮沸消毒法、巴氏消毒法、酒精消毒法、紫外线消毒法。适用对象：操作空间、双手等 灭菌：用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。常用方法：湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌。适用对象：接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。 灭菌和消毒的种类 主要方法 应用范围 灭菌 湿热灭菌(高压蒸汽灭菌法） 100 kPa、121 ℃维持15～30 min 培养基及多种器材、物品 干热灭菌 干热灭菌箱160～170 ℃加热2～3 h 玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品 灼烧灭菌 酒精灯火焰灼烧 微生物接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具等，接种过程中的试管口或瓶口等 消毒 煮沸消毒法 100 ℃煮沸5～6 min 家庭餐具等生活用品 巴氏消毒法 62～65 ℃煮30 min或80～90 ℃煮30 s～1 min 牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体 紫外线消毒 30 W紫外灯照射30 min（使用前适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液可加强消毒效果） 接种室空气、超净台等 化学药物消毒 用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹，来苏尔喷洒，水源中通入氯气等 皮肤、伤口、动植物组织表面和空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等 典型例题：（2020·山东烟台·高二期中）在微生物的培养和研究中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。实验室常采用高压蒸汽灭菌、灼烧、干热灭菌、紫外线照射等几种灭菌方法，可分别杀灭哪些部位的杂菌（ ） A．培养基、接种环、接种室、吸管 B．吸管、接种环、培养皿、接种箱 C．吸管、接种环、培养基、双手 D．培养基、接种环、吸管、接种箱 变式训练： 1．（多选题）（2020·