内容正文:
课题三 血红蛋白的提取和分离
专题五 DNA和蛋白质技术
本专题复习点:
血红蛋白的特点P67
分离蛋白质的原理(依据):
两条α-肽链
两条β一肽链
四个亚铁血红素基团
→使血红蛋白呈红色
在分离时便于观察
↑
蛋白质各种特性的差异:
1.分子的形状、大小
2.电荷性质和多少
3.溶解度
4.吸附性质
5.对其他分子亲和力
1.分子大小:对于分子大小方面有一定差别的蛋白质可采用离心、凝胶色谱法、透析、电泳等方法将它们分开。
2.形状:对两种相同质量的蛋白质而言,球形蛋白质具有较小的有效半径,在通过膜、凝胶过滤或电泳凝胶中的小孔运动时,遇到的摩擦力小,从而也能达到分离蛋白质的目的
3.溶解度:蛋白质具有盐溶和盐析现象,根据蛋白质在不同浓度的盐溶液中溶解度不同,通过控制盐浓度可分离析出蛋白质;蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度有很大不同
4.电荷:蛋白质净电荷取决于氨基酸残基所带正负电总和,利用待分离样品中各种分子带电性质,可用电泳的方法将其分离
5.吸附性、亲和力:不同蛋白质对不同的离子交换填料的吸附容量不同,蛋白质因吸附容量不同或不吸附而分离。
接下来,我们学习蛋白质分离的第一种方法——凝胶色谱法
课题三 血红蛋白的提取和分离
专题五 DNA和蛋白质技术
本专题复习点:
血红蛋白的特点P67
分离蛋白质的原理(依据):
分离蛋白质的方法:
各分离方法的原理、过程
缓冲溶液的定义、组成及作用
血红蛋白提取和分离的具体实验操作
两条α-肽链
两条β一肽链
四个亚铁血红素基团
→使血红蛋白呈红色
在分离时便于观察
↑
蛋白质各种特性的差异
凝胶色谱法、电泳法
:琼脂糖凝胶电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS —聚丙烯酰胺凝胶电泳
多糖类化合物(如:琼脂糖、聚丙烯酰胺、葡聚糖)构成的小球体
概念:
凝胶色谱法也称为分配色谱法,它是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
凝胶特点:
考点一:凝胶色谱法的概念、原理及操作过程
在小球体内部有许多贯穿的通道
——多糖类化合物构成的微小的多孔球体
而正是由于凝胶内部有许多贯穿的通道,所以,当不同的蛋白质通过凝胶时
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当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时
相对分子质量较小
相对分子质量较大
凝胶内部的通