内容正文:
第2章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
一、植物细胞工程的基本技术
1.植物组织培养技术
(1)原理:植物细胞的 。
含义:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生 或 的潜能。
在生物体内的细胞不表现出全能性的原因:基因在特定的时间和空间条件下 表达, 为不同的组织、器官。
(2)概念:是指将离体的植物 、 或 等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成 的技术。
(3)菊花的组织培养
原理:植物细胞具有 。
操作流程:
植物激素在组织培养中的作用:植物激素中 和 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
生长素与细胞分裂素的用量比值
植物细胞的发育方向
比值高
有利于根的分化、抑制芽的形成
比值低
有利于芽的分化、抑制根的形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
方法步骤:制备 培养基:配置各种母液。无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存。激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/mL的质量浓度单独配成母液。熔化琼脂,加入蔗糖30g,依次加入配制好的大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,加蒸馏水定容至1000mL,并调节PH。诱导菊花愈伤组织的培养基加入0.5mg/L的 和 ;诱导菊花生芽的培养基加入2~3mg/L和0.02~0.3mg/L的 和 ;诱导菊花生根的培养基将硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁、二水合氯化钙用量减半,并添加0.1mg/L的 或 。灭菌:培养基和所有的器械进行 灭菌。外植体消毒:流水冲洗后的外植体用70%的 消毒30s,立即用无菌水清洗2~3次,再用5%左右的 溶液处理30min后,立即用无菌水清洗2~3次。接种:在 旁进行,对接种工具要用 灭菌。将菊花外植体插入培养基中时注意 。培养:在18 ℃~22 ℃的 中培养,15~20d后,将生长良好的 转接到诱导生芽的培养基,长出芽后再转接到诱导生根的培养基,进一步诱导形成试管苗。移栽:先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱生长几日。用流水清洗根部培养基,将幼苗移栽到 的蛭石或珍珠岩等环境生活一段时间,幼苗长壮后再移栽到土壤。幼苗移栽后,适时浇水、施肥,直至开花。
2.植物体细胞杂交技术
(1)流程:
过程①为去除 获得 ,常用方法是酶解法,所利用的酶是 。过程②是 ,人工诱导的物理法包括 、 等;化学方法包括 、
等。
过程③是原生质体融合后再生出 ,这是原生质体融合成功的标志。
(2)杂种细胞的类型有三种: ,符合要求的只有AB,需要进行 。
(3)植物体细胞杂交成功的标志: 。
(4)意义(优点):植物体细胞杂交技术 。
(5)植物体细胞杂交的原理:原生质体融合的原理: ,杂种细胞发育成杂种植株即植物组织培养的原理: 。
(6)变异类型:属于 ,杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和,形成异源多倍体。
(7)概念:是指将 的植物体细胞,在一定条件下融合成 ,并把 培育成新植物体的技术。
二、植物细胞工程的应用
1.植物繁殖的新途径
(1)微型繁殖:用于快速繁殖优良品种的 技术,形象的称为植物的