第1章 第2节 二 微生物的选择培养和计数-【高考领航】2021-2022学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程同步核心辅导与测评教师用书（人教版）

二　微生物的选择培养和计数 [目标领航]　1.运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养基的原理。2.理解通过调整培养基的配方有目的地培养某种微生物。3.掌握测量微生物数量的常用方法。 选择培养基 1．水生栖热菌的筛选 水生栖热菌能在70～80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 2．选择培养基概念 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 3．选择培养基的应用 实验室筛选微生物，即人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他种类的微生物生长。 4．选择培养基的实例 选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。 微生物的选择培养 微生物的数量测定 1．统计菌落数目常用方法：稀释涂布平板法。 2．原理 (1)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 (2)通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含多少活菌。 (3)为保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板计数。 [特别提醒](1)为了保证结果准确，一般设置3个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。 (2)统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 (3)设置对照：主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 3．其他方法 利用显微镜直接计数，其优点是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法，缺点是统计结果是活菌数和死菌数的总和(不能区分活菌和死菌)。 (正确的打“√”，错误的打“×”) 1．在用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。(√) 2．在稀释涂布平板法中，需要涂布3个平板作为重复实验，统计时取平均值，以减少偶然因素对实验结果的影响，增强实验结果的说服力。(√) 3．要选取菌落数目稳定时的记录作为结果是尽量缩小统计的菌落数与实际活菌数的差值，因为繁殖慢的菌体开始看不出明显的菌落。(√) 4．统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板上菌落数的平均值，然后按照公式进行计算。(√) 5．稀释涂布平板法计数的值比实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。(√) 6．显微计数法计数的结果比实际值偏大，原因是显微镜下无法区分细胞的死活，计数时包括了死细胞。(√) 知识点一　选择培养基 1．概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 2．制备原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某一化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。 3．制备方法：在培养基中加入某种允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的化学成分。 4．用途：使混合菌株中的目的菌变成优势菌，提高该菌的筛选率。 5．实例：在培养基中以尿素为唯一的氮源，可筛选出能分解尿素的微生物(所需培养基的配方如表所示)。 培养基组成 提供的营养或作用 KH2PO4 1.4 g 无机盐 Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖10.0 g 碳源 尿素1.0 g 氮源 琼脂15.0 g 凝固剂 将上述物质溶解后，用水定容至1 000 mL [特别提醒]　分离尿素分解菌所用的培养基中，起选择作用的物质是尿素，它是该培养基中唯一的含氮的物质，只有能合成脲酶的微生物才能分解利用尿素，从而在该培养基上生长繁殖，其余微生物因不能利用尿素而缺乏氮元素的来源，不能生长繁殖。 　常见选择培养基的设计原理与应用实例 选择培养基 设计原理 应用实例 具体处理 分离菌种 依据营养需求 不添加碳源 自养微生物(硝化细菌等) 不添加氮源 固氮微生物(硝化细菌等) 以尿素为唯一氮源 能分解尿素的微生物 以石油为唯一碳源 能分解石油的微生物 加入某种化学物质，其不作为营养物质，对目标微生物无害，但会抑制或杀死其他微生物 加入青霉素、四环素或链霉素 抑制细菌和放线菌生长→分离酵母菌、霉菌等 加入10%的酚 抑制细菌和霉菌生长→分离放线菌 利用特殊环境 置于无氧条件下 厌氧型和兼性厌氧型微生物 置于高盐环境中 其他菌在高盐环境中易失水而不能生存→分离金黄色葡萄球菌 置于高温环境中 其他微生物因酶失活而无法生存→分离耐高温微生物 根据用途可以将培养基分为选择培养基和鉴别培养基，两者具有不同的特点，很容易混