第20讲　基因工程—浙江省桐庐分水高级中学2021届高考生物复习讲义（无答案）

专题九 现代生物技术专题 第20讲　基因工程 核心要点 1．基因工程的原理和技术 (1)将同一种限制性核酸内切酶切割的质粒与目的基因片段混合，加入DNA连接酶，两两连接的产物(重组DNA分子)有以下3种：目的基因与 的连接物；质粒与 的连接物；目的基因与 的连接物。其中，只有 的连接物才是真正需要的。 (2)双酶切法 双酶切法的优点主要在于防止质粒和目的基因 和随意连接以及保证目的基因 质粒。 2．转基因动物、植物及微生物的培育流程 提醒　(1)一般用同种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因，实际应用双酶切法。 (2)DNA连接酶≠DNA聚合酶：DNA连接酶连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。 (3)限制性核酸内切酶≠DNA酶≠解旋酶：限制性核酸内切酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶是将DNA水解为组成单位；解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 (4)启动子、终止子：启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。 (5)标记基因≠抗性基因：标记基因一般为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(或目的基因是否导入成功)，从而将含目的基因的细胞筛选出来。 (6)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个粘性末端。 (7)农杆菌转化法不是将农杆菌的重组质粒直接导入到植物细胞中，农杆菌易感染植物细胞，并将其Ti质粒上的T－DNA(可转移的DNA)转移并整合到受体细胞染色体DNA上。 (8)植物细胞的全能性较高，可经植物组织培养过程成为完整植物体，因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞；动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。 3．有关质粒的四点认识 (1)从存在位置看——在细菌中独立于拟核之外。 (2)从化学成分上看——为双链环状DNA分子。 (3)从功能上看——能够自主复制。 (4)从结构上看——常含有抗生素抗性基因。 4．目的基因是否表达的检测 命题热点 命题点一　考查基因工程的工具 1．(2016·全国Ⅲ，40节选)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了Ec