2.2.1动物细胞工程 课件 2020-2021学年高二生物人教版选修3（含视频）

2.2 动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养（基础） 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 * 第5周周四课堂测试 范围：必修一全部+必修二遗传规律+基因工程+细胞工程（不包括动物细胞融合和单克隆抗体） 题量：12+4选择题，4道填空 时间：45分钟。 要求：同学们在完成作业的同时，将考试内容合理安排时间进行复习。 * 如何治疗烧伤？ 对烧伤患者来说，真皮移植类似拆东墙补西墙---医生需要从他们身体其他部位取下一块完好的皮肤，重新植入烧伤部位。尽管能治愈创面，但在取皮部位却留下了新的创伤，常常导致疤痕增生，甚至因取皮过深，供皮区难以自愈，形成水疱，反复溃疡，导致“好了旧伤又添新疤”。遇到大面积严重烧伤的病人，如果其正常皮肤所剩无几，缺乏自体皮源及时封闭创面，常常引起创面及全身严重的感染等一系列并发症，有可能危机生命。因此，国际医学界一直试图在体外制造一种皮肤代用品，用来更换人体损坏的皮肤组织。 皮肤移植 * 人造皮肤 人造皮肤是采用工程学和细胞生物学原理方法，在体外重建具有生物学活性的皮肤类似物，用来修复、替代缺损的皮肤组织。只需指甲大小的人类皮肤组织，便可培养出数亿倍的“活性皮肤”， 10天可以培养完成，可避免排斥反应。我国“人造皮肤”已经开始临床试验。 * 一、动物细胞培养 1.概念： 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 动物细胞培养就是从动物的机体中取出相关的组织，将他们分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 动物细胞培养过程是怎样的？ 培养时需要提供哪些必备的条件？ * 2.动物细胞培养的过程： 1)通常应取哪些组织？为什么？ 2)为什么要用胰蛋白酶处理？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？用胃蛋白酶行吗？ 3)什么是细胞贴壁和接触抑制？ 4)什么是原代培养和传代培养？ 5)细胞培养一般培养几代？ 为什么？ * 2.动物细胞培养的过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 剪碎 胰蛋白酶处理 思考2、取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的原因是什么？ 幼龄比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。一般分化程度越低，增殖能力越强，越容易培养。 思考1、通常应取哪些组织或器官？ 因为成块组织不利培养，要用胰蛋白酶消化细胞间的蛋白质分散细胞。胰蛋白酶长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 思考3、为什么要用胰蛋白酶处理？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？用胃蛋白酶行吗？ 动物细胞培养适宜的pH为7.2-7.4，此环境下胃蛋白酶（适宜pH2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 * 2.动物细胞培养的过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶处理 培养液培养 细胞贴壁 培养液培养 思考4、什么是细胞贴壁？ 思考5、什么是接触抑制？ 接触抑制 指细胞悬浮液中分散的细胞贴附在瓶壁上。 要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附。 指贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂的现象。 胰蛋白酶处理 分瓶继续培养 指将动物组织消化后初次培养的过程。 思考6、什么是原代培养？ 原代培养 培养液培养 传代培养 思考7、什么是传代培养？ 传代培养指将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理后,再分瓶继续培养的过程. * 2.动物细胞培养的过程： 无限传代 细胞株 细胞系 培养液培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶处理 培养液培养 细胞贴壁 培养液培养 接触抑制 胰蛋白酶处理 分瓶继续培养 原代培养 培养液培养 传代培养 细胞株：传代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到50代，这种传代细胞称为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞株遗传物质未改变；细胞系遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 * 【P46讨论】多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考并讨论以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 提示：充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 提示：无菌、无毒的环境。 3．动物细胞培养液的主要成分是什么？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 * 3、动物细胞培养的条件 ①无菌、无毒环境 ②营养 ③温度和pH ④