2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 课件 2020-2021学年高二生物人教版选修3（含视频）

* 全球首个BTLA靶点单抗药物临床获FDA受理 降价超一半17种抗癌药纳入医保西妥昔单抗注射液降3000元 * * 2.2 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 * 必修一P67 思考： （1）该实验可以说明________________。 （2）该实验使用的研究方法是__________。 （3）诱导两种动物细胞融合的常用诱导剂是______。 细胞膜具有流动性 荧光蛋白标记法 聚乙二醇PEG 灭活的病毒 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 * 一、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合（cell fusion）也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞，称为杂交细胞。 * 2.融合过程： 取不同DNA的两个细胞 灭活的病毒诱导 细胞融合 杂交细胞 3.诱导方法： 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激等 聚乙二醇（PEG)等 * 一、动物细胞融合 5.意义： 克服远缘杂交不亲和的障碍，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 6.应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段； 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 4.原理： 细胞膜的流动性 * 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 物理(离心、振荡、 电刺激)、化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 分册二P43-44 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 融合原理 融合前的处理 使用的酶 诱导方法 主要用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 * 二、单克隆抗体 ①什么是抗体？ ②抗体如何产生？ ③用传统的方法如何获得抗体？有什么缺陷？ 抗体是机体受____物质刺激，由____细胞产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的______。 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。 缺陷：纯度低、产量低、特异性差。 抗原 浆 球蛋白 思考 ？ 抗体 抗原 B细胞 刺激 增殖 分化 浆细胞 分泌 * 1、设计方案： 1975年，米尔斯坦和科勒的实验方案： 是指化学性质单一、特异性强的抗体。 二、单克隆抗体 单克隆抗体制备过程 ◆ 利用_____________产生特异性抗体的功能。 ◆ 利用____________无限增殖的特性。 ◆ 利用_____________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。 ◆ 利用____________技术大量培养杂交瘤细胞。 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 动物细胞融合 动物细胞培养 * B淋巴细胞间的融合、 骨髓瘤细胞间的融合 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞间的融合形成的杂交瘤细胞 (选择培养基) (专一抗体 检验阳性) 2、制备过程： 特异性强，灵敏度高，并且可以大量制备 免疫小鼠 骨髓瘤细胞 单克隆抗体 筛选 克隆、筛选 体内培养 注射到小鼠腹腔 体外培养 B淋巴细胞 细胞融合 杂交细胞 * 1)本过程利用了哪些原理或技术？ 2)为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 思考： 免疫学原理、细胞融合原理、动物细胞培养原理 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。 * 3)整个制备过程为何要经过两次筛选? 思考： 第一次筛选得到杂交瘤细胞。 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 * 3.单克隆抗体的应用 二、单克隆抗体 * 3.单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高，并且可以大量制备。 二、单克隆抗体 （1）作为诊断试剂：这是单克隆抗体最广泛的用途，具有______________________的优点。 （2）用于治疗疾病和运载药物： 在临床上主要用于癌症治疗。 运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导弹” 准确、高效、简易、快速 * * 细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体 作业：写出细胞工程6项技术的流程图 植物细胞工程 动物细胞工程 * 植物体细胞杂交技术知识延伸： 细胞膜的流动性、细胞壁的成分、 参与新细胞壁形成的细胞器 植物组织培养技术知识延伸： 植物的激素调节： 有丝分裂过程 细胞分裂素、生长素 植物细胞的增殖： 基因选择性表达 植