内容正文:
考点01 DNA重组技术的基本工具
一、单选题
1.(2021·长春市第二十九中学高二期中)下列关于DNA连接酶的叙述,正确的是( )
A.DNA连接酶不需要识别特定的脱氧核苷酸序列
B.一种DNA连接酶只能连接一种黏性末端
C.将单个脱氧核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯键
D.连接两条DNA链上碱基之间的氢键
【答案】A
【分析】
DNA连接酶:(1)根据酶的来源不同分为两类:E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低。(2)DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
【详解】
A、DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖,不需要识别特定的脱氧核苷酸序列,A正确;
B、DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖,所以一种DNA连接酶可以连接多种黏性末端,B错误;
C、DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯键,C错误;
D、DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖,形成磷酸二酯键,D错误。
故选A。
2.(2021·天津市滨海新区大港太平村中学高二期中)下列有关基因工程中载体的说法正确的是( )
A.质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DNA分子
B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C.质粒载体的复制和表达不遵循中心法则
D.作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因
【答案】D
【分析】
关于运载体,考生可以从以下几方面把握:
(1)常用的运载体:质粒(质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子)、噬菌体的衍生物、动植物病毒;
(2)作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点; ②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来;
(3)天然的质粒不能直接作为载体,基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
【详解】
A、质粒是一种独立于细菌拟核外的环状DNA分子,A错误;
B、天然的质粒不能直接作为载体,基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的,B错误;
C、质粒载体的复制和表达遵循中心法则,C错误;
D、作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因,可以作为标记基因,对重组后重组DNA进行筛选,D正确。
故选D。
3.(2021·山东泰安市·高二期中)在基因工程操作中,科研人员利用两种限制酶(R1和R2)处理基因载体,进行电泳检测,结果如图所示。以下相关叙述中,不正确的是( )
A.该载体最可能为环形DNA分子
B.两种限制酶在载体上识别的序列可能相同
C.限制酶R1与R2的切点最短相距约200bp
D.限制酶作用位点会导致磷酸二酯键断裂
【答案】B
【分析】
切割DNA的工具是限制性核酸内切酶,它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
【详解】
A、由题意可知,当仅用一种限制酶切割载体时,仅产生一种长度的DNA片段,因此该载体最有可能为环状DNA分子, A正确;
B、由题意可知,当仅用一种限制酶切割载体时,两种限制酶切割产生的DNA片段等长,而两种限制酶同时切割时则产生两种不同长度的DNA 片段,所以两种限制酶在载体上各有一个酶切位点,识别的序列不相同,B错误;
C、由题意可知,两种限制酶同时切割时产生600bp和200bp两种长度的DNA片段,所以两种限制酶的酶切位点至少相距200bp,C正确;
D、限制酶切割DNA分子,破坏的作用位点是两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,D正确。
故选B。
4.(2021·周口市中英文学校高二期中)下列关于质粒的叙述,正确的是( )
A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B.质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子
C.质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制
D.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的
【答案】B
【分析】
1、天然的质粒不能直接作为载体,基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。
2、作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点; ②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】
A、质粒是存在于细菌中一种环状DNA分子,不是细胞器,A错误;
B、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA