内容正文:
考点12 重组DNA技术的基本工具
一、单选题
1.(2021·哈尔滨市第一六二中学校高二月考)人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是( )
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量 D.便于与外源基因连接
【答案】B
【分析】
作为运载体必须具备的条件:
①要具有限制酶的切割位点,便于与外源基因连接;
②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;
③能在宿主细胞中稳定存在并复制;
④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】
A、抗性基因的作用是筛选重组质粒,并不是提高受体细胞的耐药性,A错误;
B、抗性基因作为标记基因,便于重组DNA的鉴定和筛选,即有利于对目的基因是否导入进行检测,B正确;
C、抗性基因与增加质粒分子的分子量无关,C错误;
D、质粒上具有限制酶的切割位点,便于与外源基因连接,但切割点不在抗性基因上,D错误;
故选B。
2.(2021·黑龙江大庆市·大庆中学高二月考)下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述,错误的是( )
A.一种限制性核酸内切酶只能识别某种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性核酸内切酶的活性受温度影响
C.只有用同一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒,才能形成重组质粒
D.限制性核酸内切酶可从原核生物中提取
【答案】C
【分析】
1、限制性核酸内切酶
(1)来源:主要从原核生物中分离纯化出来;
(2)特点:具有特异性,即能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂;
(3)作用结果:形成黏性末端和平末端两种;
(4)限制性核酸内切酶的化学本质是蛋白质,其活性受温度、pH的影响。
2、酶的特性
(1)高效性:酶的催化效率大约是无机催化剂的107~1013倍。
(2)专一性:每一种酶只能催化一种或一类化学反应。
(3)作用条件较温和:高温、过酸、过碱都会使酶的空间结构遭到破坏,使酶永久失活;在低温下,酶的活性降低,但不会失活。
【详解】
A、限制性核酸内切酶具有特异性,故一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核糖核苷酸序列并从特定的位点进行切割,A正确;
B、酶的作用条件温和,其活性受温度、pH等的影响,B正确;
C、可以用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒,也可以用两种不同的限制性核酸内切酶处理,只要具备相同的粘性末端便可以连接目的基因和质粒,C错误;
D、限制性核酸内切酶是原核生物长期自然进化过程中形成的防御外来DNA的机制,目前发现的限制性核酸内切酶主要来源于原核生物,D正确。
故选C。
3.(2021·天津高二月考)据图所示,有关工具酶功能的叙述不正确的是( )
A.限制性内切酶可以切断a处
B.DNA聚合酶可以连接a处
C.解旋酶可以使b处解开
D.DNA连接酶可以连接c处
【答案】D
【分析】
分析题图:图示为某DNA分子一个片段,其中a为磷酸二酯键,b为氢键,c为脱氧核苷酸内部的磷酸键。
【详解】
A、限制酶可以切断脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,即a处,A正确;
B、DNA聚合酶可以连接脱氧核苷酸形成磷酸二酯键,即a处,B正确;
C、解旋酶可以使氢键断裂,即b处,C正确;
D、DNA连接酶可以连接DNA片段形成磷酸二酯键,即a处,D错误。
故选D。
4.(2021·天津高二月考)作为基因的运输工具一载体,必须具备的条件之一及理由是( )
A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因
B.具有多个限制酶切点,以便目的基因的表达
C.具有某些标记基因,以便筛选含目的基因的受体细胞
D.它的参与能够使标记基因在宿主细胞中复制并稳定保存
【答案】A
【分析】
1、用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2、为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点,以便于目的基因的插入; ②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】
A、作为运载体必须具备的条件之一是能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因,A正确;
B、作为运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点,以便于目的基因的插入,B错误;
C、作为运载体必须具备的条件之一是具有某些标记基因,以便于重组后进行重组子的筛选,C错误;
D、携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后,停留在细胞中进行自我复制,或整合到染色体DNA上,随着染色体DNA进行同步复制,由此可见,目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存并不一定需要运载体的参与,D错误。
故选A。
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