内容正文:
考点02 微生物的基本培养技术
一、单选题
1.(2021·浙江高三二模)下列有关大肠杆菌的培养与分离实验的操作,合理的是( )
A.用无菌水配制LB培养基
B.培养基的pH值应调至中性偏碱
C.应加入饲养层细胞以支持生长
D.通常在培养基中加入抗生素来消灭杂菌
【答案】B
【分析】
培养大肠杆菌常用LB培养基,培养基的成分为蛋白胨、酵母膏、NaCl,加蒸馏水溶解,调节pH值至中性偏碱。
【详解】
A、配制LB培养基应用蒸馏水,A错误;
B、因为大肠杆菌适宜在中性偏碱的环境中生存,故培养大肠杆菌的培养基,pH值应调至中性偏碱,B正确;
C、大肠杆菌可直接利用培养基中的营养物质生长,不需要饲养层细胞,C错误;
D、在培养基中加入抗生素会杀死细菌,大肠杆菌也会被杀死,D错误。
故选B。
2.(2021·天津高二月考)下列有关微生物实验室培养的说法不正确有几项( )
①制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序:计算、称量、熔化、消毒、倒平板
②根据对生存环境的要求,在对应环境中寻找,就一定能寻找到目的菌株
③稀释涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
④灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子
⑤平板划线操作第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物感染操作者
⑥稀释涂布平板法进行梯度稀释时,要用移液管吹吸试管中溶液几次,目的是达到足够稀释倍数
⑦平板划线在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来自第一次划线末端
A.1项 B.2项 C.3项 D.4项
【答案】D
【分析】
微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需要将培养基pH调至酸性,培养细菌时需要将培养基pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时需要提供无氧条件。
【详解】
①制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序:计算、称量、熔化、灭菌、倒平板,①错误;
②根据对生存环境的要求,在对应环境中寻找,寻找到目的菌株的概率较大,但是不一定能寻找到目的菌株,②错误;
③稀释涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面,③正确;
④灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子,④正确;
⑤平板划线操作第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基,⑤错误;
⑥稀释涂布平板法进行梯度稀释时,要用移液管吹吸试管中溶液几次,目的是为了使微生物和无菌水混合均匀,⑥错误;
⑦平板划线在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来自第一区域的菌种,⑦正确。
故选D。
3.(2021·天津高二月考)平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述中错误的是( )
A.平板划线法要求要连续多次划线,且除了第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的终点
B.除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外,以后的划线可以不用灭菌
C.如果菌液本来浓度不高,则可以适当降低稀释倍数
D.充分稀释和连续划线的目的都是为了使形成的菌落是由单一的细菌细胞繁殖而成
【答案】B
【分析】
微生物常见的接种的方法①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在划线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。
【详解】
A、平板划线法要求要连续多次划线,且除了第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的终点,逐步稀释成单个菌,A正确;
B、接种环每次使用前都要进行灼烧灭菌,B错误;
C、如果菌液本来浓度不高,则可以适当降低稀释倍数,C正确;
D、充分稀释和连续划线的目的都是为了使形成的菌落是由单一的细菌细胞繁殖而成,D正确。
故选B。
4.(2021·广东揭阳市·揭阳华侨高中高二月考)下列有关微生物的培养或纯化的叙述,错误的是( )
A.分离自养型微生物时,培养基中加入的琼脂可作用碳源
B.培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径
C.在培养微生物前要先对培养基进行灭菌处理再接种
D.菌种可接种在斜面固体培养基上,培养后放在4 ℃冰箱中临时保藏
【答案】A
【分析】
1、微生物培养过程中要进行无菌操作,关键就在于防止外来杂菌的入侵,其中消毒和灭菌室常用的防止杂菌入侵的方法。
2、微生物的实验室分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法,通过不同方式的稀释,最终分离得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
【详解】
A、分离自养型生物能利用无机碳源,故分离的时候,应在培养基中不加入有机碳源,而琼脂是作为凝固剂,A错误;
B、酵母菌是兼性厌氧菌,所以培养液中溶氧量的变