精做14 生物实技术实践-备战2021年高考生物大题精做（新高考专用）

精做15生物技术实践 1．金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物，能够产生肠毒素，引发食物中毒。该菌耐高盐，可在盐浓度接近8%的环境中生长。哥伦比亚血平板的主要成分是蛋白胨、淀粉、葡萄糖、无菌脱纤维羊血、维生素、酵母粉等。金黄色葡萄球菌在血平板上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，因此在光下观察菌落会发现周围产生了透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答下列问题： （1）由于金黄色葡萄球菌具有______的特性，因此7.5%aCl肉汤培养基适合金黄色葡萄球菌生长繁殖，而不利于其他多种微生物生长繁殖，从功能上看该培养基属于______培养基。用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是__________________。 （2）从培养过程分析，振荡培养的目的是______________________。 （3）在配制哥伦比亚血平板时，添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌______（填“之前”或“之后”），原因是________________________。 （4）图中血平板上的接种方法是____________。多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带，因此，需要对本次操作进行完善，具体方案是____________。 【答案】耐高盐 选择 增加金黄色葡萄球菌的浓度 （2）使微生物与营养物质充分接触并提高培养液中的氧气含量 之后 防止高温破坏红细胞 平板划线法 周围存在透明的溶血圈 设置不加（鲜）牛奶其他操作均相同的对照组（写出设置不加牛奶的对照可得分） 【解析】 ⑴金黄色葡萄球菌具有耐高盐的特性，加入7.5%aCl的肉汤培养基适合金黄色葡萄球菌生长，能抑制其他微生物的生长，所以从功能上分析，该培养基属于选择培养基。加入7.5%aCl能够抑制其他微生物生长，促进金黄色葡萄球菌的生长，以增加其数量。 ⑵振荡培养能够使微生物与营养物质充分接触，同时提高培养液中的氧气含量。 ⑶配制平板时，先进行高压蒸汽灭菌，再加入无菌脱纤维羊血，否则会因高温破坏红细胞。 ⑷据图可判断，图中的菌落分布不均匀，故接种方法为平板划线法。金黄色葡萄球菌能破坏菌落周围的红细胞，出现透明的溶血圈，可据此特征鉴定出培养基中生长的菌落为金黄色葡萄球菌。本次实验中缺乏对照组，需要设置设置不加牛奶其他操作均相同的对照组，若对照组中无金黄色葡萄球菌，则证明此菌来自鲜牛奶。 2．尿素最初是从人的尿液中发现的，但随着科学家成功实现尿素的体外人工合成，尿素的生产逐渐走向工业化，尿素也逐步成为一种重要的农业氮肥。下图是土壤中分解尿素的细菌分离与计数的基本流程，请回答有关问题： （1）配制图中所用培养基，在熔化琼脂时需要不断用玻棒搅拌，目的是_____ 。配制好的培养基转移到锥形瓶中后，可采用_____方法进行灭菌。 （2）该过程采用的接种方法是 _____，培养一段时间要能在培养基表面形成单个的菌落，从操作层面需要满足两个条件：一是_____；二是涂布时要尽量做到均匀涂布。 （3）该实验中的选择培养基对分解尿素的细菌具有选择作用，其原理是_____。若要判断选择培养基是否起到了筛选的作用，对照组的设置是_____。 （4）一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_____。 （5）在筛选尿素分解菌的培养基中应加入_____，用于鉴定该种细菌能够分解尿素。 【答案】防止琼脂糊底而导致烧杯破裂 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板法 菌液的稀释度要足够高 只有以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长 用完全培养基接种后在相同条件下同时培养 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 酚红指示剂 【解析】（1）图中所示为固体培养基，在熔化琼脂时需要不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂，培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。 （2）由于本实验需要进行计数，所以采用的接种方法是稀释涂布平板法；培养一段时间要能在培养基表面形成单个的菌落，需要菌液的稀释度要足够高，防止多个细菌连在一起。 （3）由于只有以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长，所以该培养基能够起到筛选分解尿素的微生物的作用，为判断其是否起到了筛选作用，需要用完全培养基接种后在相同条件下同时培养，如果完全培养基上的菌落数目大于选择培养基，则说明起到选择作用。 （4）由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 （5）可以在筛选尿素分解菌的培养基中应加入酚红指示剂，鉴定该