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精做14现代生物工程技术
1.自新型肺炎爆发以来,我国在新型冠状病毒疫苗的研究上走在了世界的前列。常见的疫苗有灭活疫苗、核酸疫苗等多种。回答下列问题:
(1)灭活疫苗是指用__________________手段使新型冠状病毒__________________,但是不破坏其抗原结构,从而能够刺激机体产生免疫应答。
(2)我国科学家陈薇教授将编码新型冠状病毒(RNA病毒)表面抗原的核苷酸序列,与腺病毒(DNA病毒)的核苷酸序列“拼接”在一起,研制出了核酸疫苗。此过程必不可少的酶有________________,腺病毒的作用是__________________。
(3)若想在短时间内获得大量的核酸疫苗,常用到__________________反应,其扩增的过程是_______(用简练文字和“→”表示)。
(4)若在分子水平上检测该疫苗是否发挥了作用,应该用________对接种者的血清进行检测,若出现了杂交带,说明该疫苗研制成功。
【答案】物理或化学 失去感染能力 逆转录酶、限制酶、DNA连接酶 目的基因的载体(或目的基因的“分子运输车”) 多聚酶链式 受热变性→冷却复性→加热延伸 新型冠状病毒的表面抗原
【解析】
(1)灭活疫苗是指用物理或化学手段使新型冠状病毒失去感染能力,并保持抗原结构,具有抗原的作用,从而能够刺激机体产生免疫应答。
(2)我国科学家陈薇教授将编码新型冠状病毒(RNA病毒)表面抗原的核苷酸序列,与腺病毒(DNA病毒)的核苷酸序列“拼接”在一起,研制出了核酸疫苗。此过程为基因工程技术,故需要的酶有逆转录酶、限制酶、DNA连接酶,腺病毒的作用是目的基因的载体,运载目的基因进入受体细胞。
(3)若想在短时间内获得大量的核酸疫苗,常用到多聚酶链式反应(PCR技术),其扩增的过程分为个阶段:受热变性是DNA双链解旋为单链,冷却复性是引物与模板链DNA结合,加热延伸是在Taq酶的作用下延伸DNA子链,即受热变性→冷却复性→加热延伸。
(4)若在分子水平上检测该疫苗是否发挥了作用,应该用新型冠状病毒的表面抗原对接种者的血清(抗体主要在血清里)进行检测,若出现了杂交带,说明产生了相应的浆细胞,进而产生了针对新冠病毒的抗体,进一步说明疫苗研制成功。
2.CEA癌胚抗原是在1965年首先从结肠癌和胚胎组织中提取出的一种肿瘤相关抗原,是一种酸性糖蛋白。常用CEA抗体检测血清中的CEA含量,进行相关疾病的临床诊断。下图是CEA单克隆抗体的制备流程示意图,请据图回答下列问题:
(1)①表示从cDNA文库中扩增获取大量目的基因的过程,那么A和人体内的CEA基因的结构上的区别是________。制备重组质粒过程时,为确保目的基因与质粒准确连接,应采用图示中的________酶的切割位点。过程②常用________法。
(2)诱导融合成为杂交瘤细胞时,常用的诱导因素有________(写出三种)。细胞培养过程中需要的气体条件是________。
(3)③表示________过程,获得的C细胞的特点是________。
(4)应用获得的单克隆抗体搭载抗癌药物制成“生物导弹”治疗癌症,具有的优点是________。
【答案】cDNA文库中扩增获得的目的基因中无启动子 AscⅠ和BamH Ⅰ切割 Ca2+处理 物理因素(振动)、化学因素(PEG)、生物因素(灭活的病毒) 5%的二氧化碳和95%的空气 克隆化培养和抗体检测 既能无限增殖,又能分泌专一抗体 特异性强,灵敏度高,可大量制备
【解析】
(1)从cDNA文库中获得目的基因和人体内CEA基因的结构区别是从cDNA文库中扩增获得的目的基因中无启动子;为确保目的基因与质粒准确连接,且在启动子和终止子之间插入目的基因,用AscⅠ酶和BamH Ⅰ酶切割,过程②常用Ca2+处理。
(2)常用的诱导因素有物理因素(振动)、化学因素(PEG)、生物因素(灭活的病毒),细胞培养过程中需要的气体条件5%的二氧化碳和95%的空气。
(3)③表示克隆化培养和抗体检测过程。获得的C细胞的特点是既能无限增殖,又能分泌专一抗体。
(4)单克隆抗体的优点是特异性强,灵敏度高,可大量制备。
3.随着现代社会逐步进入老龄化阶段,细胞及组织应用于人体器官再生的新医疗技术“组织工程”已经引起越来越多的关注,现已有包括骨组织、肝脏、角膜等组织和器官的成功再生。回答下列问题:
(1)“组织工程”的基本要素之一是要有“种子”细胞,通常干细胞可作为“组织工程”的种子细胞,原因是_____________________。为维持干细胞不分化状态,可将其培养在____________。
(2)哺乳动物的胚胎干细胞(ES细胞)是“组织工程