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23.(2021届河北衡水中学全国高三第二次联合考试河北生物试题) 尿素是一种重要的氮肥,但是不能被农作物直接吸收,只有被土壤中的细菌分解成氨后才能被植物利用。某实验小组要完成课题“从土壤中分离出能分解尿素的细菌”,回答下列问题:
(1)细菌适宜在酸碱度为_____的潮湿土壤中生长,因此土壤取样时要选择合适的地点。
(2)在该实验中,配制培养基需要以_____为唯一氮源,该培养基中_____(填“需要” 或“不需要”)添加葡萄糖,原因是_____。若要验证该培养基具有选择作用,需要设置_____作为对照,当_____时,即可说明该培养基具有选择作用。
(3)在接种前需要对样品进行稀释处理,以保证获得菌落数在_____范围、适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量,一般选用104、 105、 106倍的稀释液进行平板培养,若测定放线菌数量,则需要采用与此不一样的稀释倍数,原因是_____。
(4)在进行实验时,甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落,但是其他 同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落,若甲同学的结果有问题,则可能的原因是 _____。(答出一项即可)。
【答案】 (1). 中性(或微碱性) (2). 尿素 (3). 需要 (4). 尿素分解菌为异养生物,葡萄糖可为其提供碳源 (5). 接种相同样品的牛肉膏蛋白胨培养基 (6). 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落明显多于该培养基上的菌落 (7). 30~300 (8). 土壤中各类微生物的数量是不同的 (9). 培养基被杂菌污染或培养基中混入了其他含氮物质
【解析】
【分析】从土壤中分离微生物的一般步骤是:土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选尿素分解菌应该使用以尿素为唯一氮源的选择培养基,配制培养基的一般操作是配制培养液、调整pH、分装、包扎、灭菌、搁置斜面。微生物的计数常用稀释涂布平板法接种,采用固体平板培养细菌时,要将培养皿倒置。
【详解】(1)细菌适宜在酸碱度为中性或微碱性的潮湿土壤中生长,因此土壤取样时要选择合适的地点。
(2)在该实验中,配制培养基需要以尿素为唯一氮源,该培养基中需要添加葡萄糖为分解尿素的细菌提供碳源,原因是尿素分解菌为异养微生物,不能利用无机碳源,只能利用现成的有机碳源。若要验证该培养基具