专题19 生物技术实践-2021届广东高三生物模拟试卷分类汇编（4月刊）

21. (广东省六校联盟2020-2021学年高三2月第三次联考生物试题)广东盛产水果，很多人喜欢自己制作果酒，但有报道称，自酿果酒如果在消毒杀菌方面做得不够完善，会存在大肠杆菌超标等情况。下图为某同学对大肠杆菌进行检测的操作和配方图，大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，请利用相关的知识回答问题： 基础培养基 100ml 20%乳糖溶液 2ml 2%伊红溶液 2ml 0．5%美蓝水溶液 1ml （1）配制上图中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入_______________，从功能上划分，该培养基属于_________培养基。 （2）某同学对大肠杆菌进行计数时，吸取不同稀释度的样品各0．1ml，分别涂布到三个培养基中。每个稀释度做3个重复。在适宜条件下培养一段时间后，对平板的黑色菌落数进行统计，假如出现如下结果： 稀释倍数 101 102 103 平板 1 2 3 1 2 3 1 2 3 平均菌落数(个) 421 380 404 72 76 77 28 25 27 根据统计结果，计算出每毫升样品中大肠杆菌数约为____________个。 （3）通过菌落计数并计算后发现，稀释倍数高的组计算结果往往大于稀释倍数低的组，导致这种结果的原因最可能是___________________________________________。 （4）大肠杆菌和酵母菌的异化作用类型都是兼性厌氧型，但一般认为利用酵母菌酿制葡萄酒时，出现上面检测结果的可能性不大，原因是______________________________。 （5）上述结果也可能是培养基灭菌不合格导致，写出排除培养基灭菌不合格的实验思路：_______________________________________________，观察是否有菌落生长。 【答案】 (1). 氮源(蛋白胨) 和琼脂 (2). 鉴别 (3). 7.5 × 104 (4). 稀释倍数低的组菌液浓度更大，可能出现多个细菌连在一起形成一个菌落 (5). 在呈酸性的发酵液中酵母菌可以生长繁殖，而大肠杆菌的生长繁殖受抑制（或：酵母菌可以生长在呈酸性的发酵液中，而培养细菌时的pH值为中性或碱性） (6). 取（若干）灭菌后未接种的培养基（或空白平板）放在适宜细菌生长的条件下培养一段时间（或取灭菌后未接种的培养基（或空白平板）用无菌水涂布后放在适宜细菌生长的条件下培养一段时间） 【解析】 【分析】 1.微生物培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源；制备培养基的步骤为：计算、称量、溶化、调节pH、灭菌、倒平板；微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中后者还可以用于菌种的计数。 2.活菌计数法的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 【详解】（1）各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。配方图中的乳糖可为微生物的生长提供碳源，据此可知：在配制图中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入氮源。在固体培养基上大肠杆菌才能形成菌落，因此还需要加入琼脂作为凝固剂。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于鉴别培养基。 （2）利用稀释涂布平板法对微生物进行计数时选择菌落数在30~300的进行记数，结合表格数据可知，应选择稀释倍数为102的培养基进行计数，3个平板上的黑色菌落平均数C=(72+76+77)÷3=75，涂布平板时所用的稀释液的体积V=0.1mL每毫升样品中大肠杆菌数=(C÷V)×M=75÷0.1×102=7.5 × 104。 （3）稀释倍数低的组菌液浓度更大，更容易出现多个细菌连在一起形成一个菌落的情况，导致稀释倍数高的组计算结果往往大于稀释倍数低的组。 （4）大肠杆菌和酵母菌的异化作用类型都是兼性厌氧型，但在呈酸性的发酵液中酵母菌可以生长繁殖，而大肠杆菌的生长繁殖受抑制，因此利用酵母菌酿制葡萄酒时，出现上面检测结果的可能性不大。 （5）上述结果也可能是培养基灭菌不合格导致，取（若干）灭菌后未接种的培养基（或空白平板）放在适宜细菌生长的条件下培养一段时间，观察是否有菌落生长，可用来检测培养基灭菌是否合格。 【点睛】本题考查微生物的培养，考查对培养基制备、微生物分离、计数方法的理解，可根据稀释涂布平板法的原理计算样品中的细菌数，并进行误差分析。 21. (广东省韶关市2020-2021学年高三综合测试生物试题)科学家在垃