内容正文:
专题1 基因工程
专题1 基因工程
专题1 基因工程
专题1 基因工程
1.1 DNA重组技术的基本工具
专题1 基因工程
学习导航
1.了解限制酶及DNA连接酶的来源。
2.掌握限制酶及DNA连接酶的作用。 [难点]
3.理解载体需具备的条件。 [重点]
专题1 基因工程
一、基因工程
DNA重组技术
基因
DNA分子水平
新的生物类型和生物产品
基因工程的别名 __________________
操作环境 生物体外
操作对象 _________
操作水平 _________________
结果 _______________________
新知初探思维启动
专题1 基因工程
想一想
1.从结构上分析,为什么不同生物的DNA能够重组?
【提示】 (1)基本单位相同。(2)空间结构相同。
专题1 基因工程
二、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
1.来源:主要来自于___________。
2.特点
(1)识别双链DNA分子的某种___________序列;
(2)使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_____________断开。
原核生物
特定核苷酸
磷酸二酯键
专题1 基因工程
3.作用结果
(1)黏性末端:在所识别序列的_____________将DNA的两条链分别切开时形成的末端。
(2)平末端:在所识别序列的_________处切开时形成的末端。
中心轴线两侧
中心轴线
专题1 基因工程
想一想
2.限制性核酸内切酶的作用特点体现了酶的哪种特性?
【提示】 限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列,并且只能在特定部位切割,这说明了酶具有专一性。
专题1 基因工程
三、DNA连接酶——“分子缝合针”
1..种类
大肠杆菌
黏性
T4噬菌体
平
eq \b\lc\{(\a\vs4\al\co1(E·coliDNA连接酶\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(来源:_____________,作用:只连接互补的______, 末端)),T4DNA连接酶\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(来源:_____________,作用:对于两种末端都能连接,,但对____末端的连接效率较低))))
专题1 基因工程
2.作用:将切下的DNA片段“缝合”,恢复被限制酶切开的___________,拼接成新的DNA分子。
四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
1..种类:质粒、__________的衍生物、动植物病毒等。
磷酸二酯键
λ噬菌体
专题1 基因工程
2.适合作为载体的特点
(1)有一个至多个_________切割位点,供外源DNA片段(基因)插入其中。
(2)进入受体细胞后,能够停留在细胞中___________,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA同步复制。
(3)有特殊的__________基因,供重组DNA的鉴定和选择。
限制酶
自我复制
遗传标记
专题1 基因工程
要点一 限制性核酸内切酶
1.化学本质:蛋白质。
2.切割位点:磷酸二酯键。
磷酸二酯键指的是下图圆圈中的化学键,而限制酶切割的只能是箭头所指处的化学键,因为圈中另一个化学键属于一个核苷酸的内部。
要点突破讲练互动
专题1 基因工程
专题1 基因工程
3.限制酶切出的黏性末端和平末端的比较
专题1 基因工程
4.限制性核酸内切酶与DNA解旋酶的比较
(1)相同点:都作用于DNA分子中的化学键。
(2)不同点:两者作用部位不同,前者作用于磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键,而后者作用于两个碱基之间的氢键。
专题1 基因工程
特别提醒 黏性末端是指DNA分子在限制酶的作用下形成的具有相同碱基序列而且碱基互补配对的单链延伸末端结构,它们能够通过碱基间的互补配对重新结合,而具有平末端的DNA片段不容易结合。
专题1 基因工程
限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限制酶BamH I,EcoR I,HindⅢ以及Bgl Ⅱ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合,其正确的末端序列应该为( )
例1
专题1 基因工程
BamH I EcoRⅠ HindⅢ BglⅡ
↓ ↓ ↓ ↓
-GGATCC--GAATTC--AAGCTT--AGATCT-
-CCTAGG--CTTAAG--TTCGAA--TCTAGA-
↑ ↑ ↑ ↑
专题1 基因工程
A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列-AATT-
B.BamHⅠ和Hin