1.2.2 微生物的培养技术及应用（课件）（共27张PPT）-2020-2021学年高二下学期生物学同步精品课堂（2019人教版选择性必修3）

人教版 生物（高中） 学易同步精品课堂 微生物的培养技术及应用 第1章 第2节（建议2课时） 学习目标 核心素养 1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 2．概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 1.生命观念：各类微生物都能适应其生活环境。 2．科学思维：根据微生物的代谢类型配制选择培养基。 3．科学探究：讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。 1 课堂导入 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。 那么我们又如何达成这一目标呢？ 选择性培养基 引入概念1 2 一、选择培养基 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。 1、实例： 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。 寻找耐高温的DNA聚合酶 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 4 2.实验室中微生物的筛选： 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 ④加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 ⑤金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 ③不加含碳有机物的无碳培养基 ②不加氮源的无氮培养基 ①加入青霉素的培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或组织其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 思考讨论 选择培养基配方的设计 尿素含氮量高，化学性质稳定，是一种重要的农业氮肥，尿素施入土壤后，被某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3-、NH4+等才能被植物吸收。 尿素的立体结构 土壤中尿素分解菌之所以能将尿素分解，是因为它们能合成脲酶： CO(NH2)2+H2O 脲酶 CO2+2NH3 3 课堂活动（小组讨论） 请同学们小组为单位思考以下问题？ 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。 2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 引入概念2 2 二、微生物的选择培养 1g土壤中有多少能分解尿素的细菌? 原理：通过对土样进行充分稀释，再将菌液涂布到制备好的培养基上，即可得到能分解尿素的细菌的纯培养物。 稀释涂布平板法;是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 9 ①铲取土样，将样品装入纸袋中 ②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 1mL 1ⅹ10 90mL无菌水 1ⅹ107 1ⅹ105 1ⅹ106 1ⅹ103 1ⅹ102 1ⅹ104 1mL 1mL 1mL 1mL 9mL无菌水 1mL ②取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌 1、稀释涂布平板法的操作过程 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，培养 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒温培养箱中培养1～2 d。 2、菌种培养 恒温培养箱 3、菌种观察 在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。 引入概念2 2 三、微生物的数量测定 1、计数方法 (1)稀释涂布平板法：统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 一般统计的菌落数比活菌的实际数目低，因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 计算公式：每毫升样品中的菌株数=(C÷V)xM,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL)，M代表稀释倍数。 13 每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数x400x103x稀释倍数。 计算公式： (2)显微镜直接计数法：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。 统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。 内容 直接计数法 间接计数法 主要用具 显微镜、细菌计数板或血细胞计数板 涂布器 计数依据 细菌个数 培养基上菌落