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专题13 现代生物科技专题
1.(2021届江苏省南京市盐城市高三一模)下图为单克隆抗体制备过程示意图。下列有关叙述正确的是( )
A.X细胞是从脾脏中提取的已免疫的B淋巴细胞
B.Y细胞是杂交瘤细胞,通常取用培养10代以内的细胞
C.图中筛选过程至少两次且方法不同,最终保留抗体检测呈阳性的细胞
D.图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象
2.(2021届江苏省南京市盐城市高三一模)图1表示利用基因工程制备某种病毒单克隆抗体的操作流程,过程①的mRNA序列为5-AUCUAUGCGCUCAUCAG...(中间省略3n个核苷酸序列)…CGCAGCAAUGAGUAGCG-3'图2表示遗传信息传递过程中发生碱基配对的部分片段示意图。请回答下列问题:
(1)图1中,过程①需要的酶是__________,所用的mRNA只能从病毒感染者的__________细胞中提取。过程②需要的酶是__________。在重组质粒中,目的基因两侧必须具有__________。的核苷酸序列,以保证目的基因在受体细胞中成功表达。过程③⑤⑦中,需要依赖于生物膜的结构特点而完成的是__________
(2)图2所示物质可存在于图1中的过程__________(填序号),该物质彻底水解,可获得__________种不同的小分子物质。
(3)为扩增目的基因,某同学设计了如下六种PCR引物,其中可选用的引物是__________。
①5'-ATCTATGCGCTCATCAG-3'
②5'-GACTACTCGCGTATCTA-3'
③5'-CGCAGCAATGAGTAGCG-3'
④5'-GCGATGAGTAACGACGC-3'
⑤5'-TAGATACGCGAGTAGTC-3'
⑥5'-CGCTACTCATTGCTGCG-3'
(4)科研人员发现,某次制备获得的单克隆抗体比mRNA序列编码的抗体种少了两个氨基酸。检测发现,目的基因在复制过程中有一对碱基发生了替换,该对碱基对应于mRNA已知序列中,则发生替换的碱基对是__________(请将模板链碱基写在前面,已知起始密码子是AUG,终止密码子是UAA、UAG、UGA)
3.(广东省揭阳市2020-2021学年高三质量测试)科研人员在烟草中获得了抗病基因,拟用该基因作为目的基因培育转基因抗病棉花。据此分析回答下列问题。
(1)将该抗病基因转人棉花细胞时,所选用的基因运载体应具有_____________以便对目的基因进行筛选。
(2)构建含抗病基因的基因表达载体时需要用到的两种酶是限制性核酸内切酶和_____________两种酶中限制性核酸内切酶作用于图中的处_____________(填“a”或“b”)。
(3)将构建的基因表达载体导人棉花受体细胞的方法有花粉管通道法、基因枪法和______________法。
(4)经转化处理后的细胞通过组织培养可以形成幼苗,这是利用了植物细胞的_____________此过程中细胞会通过_____________形成愈伤组织,后经再分化形成新的棉花幼苗,这些幼苗经个体生物学水平的_____________实验鉴定后可知其是否具有抗病特性。经前述实验鉴定,发现某株幼苗没有抗病特性,其可能的原因是_____________(不考虑基因突变)。
4.(2021·江苏南通市高三一模)大丽轮枝菌(一种丝状真菌)是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根侵染路径,研究人员利用绿色荧光蛋白基因(sGFP)转染大丽轮枝菌,培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株,主要过程如下(图中a链和b链分别是相应基因转录模板链)。分析回答:
(1)过程①中,PCR扩增sGFP的原理是______,该过程除需要根据______设计特异性引物序列外,为保证sGFP正确插入到质粒中,还需要在引物的5′端添加限制酶识别序列,图中b链的黏性末端碱基序列(5′→3′)为______。
(2)过程①中,若1个sGFP片段连续扩增4次,则会形成______个两条链等长的sGFP片段。
(3)过程②需要的工具酶是______。研究中将sGFP插入到构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是______。
(4)过程③中需要配制细菌培养基,配制时要在培养基灭菌并冷却到80℃左右后,加入用______配制的适宜浓度的潮霉素溶液,潮霉素不能与培养基一同灭菌的原因是______。
(5)选择过程③筛选培养得到的不同农杆菌菌落,分别提取细菌质粒DNA,并用BamHⅠ和HindⅢ完全酶切后电泳,请在答题纸相应位置画出可能得到的电泳条带。______
(6)将导入重组质粒的农杆菌加入大丽轮枝菌的孢子细胞悬液中,在适宜条件完成转染后利用滤膜过滤得到孢子细胞,再在真菌培养基上培养获得菌落,最终通过检测