1.2-2微生物的选择培养和计数 学案【新教材】2020-2021学年人教版（2019）高二生物选择性必修3

第2节　微生物的培养技术及应用 二、微生物的选择培养和计数 知识梳理： 一、选择培养基 1．水生栖热菌的筛选：水生栖热菌能在 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下 。 2．选择培养基：在微生物学中，允许 的微生物生长，同时抑制或阻止 微生物生长的培养基。 二、微生物的选择培养 1．分解尿素的细菌的分离 分解尿素的细菌能合成 酶，该酶能催化尿素分解产生 ，以此作为细菌生长的氮源。要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方设计思路是 。 2．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌 土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行 ，然后再将菌液 到制备好的 ，操作过程如下： 采集土样→将10 g土样加入盛有90 mL 的锥形瓶中，充分 。取1 mL上清液加入盛有 mL无菌水的试管中，依次 →取 mL菌液，滴加到 表面→将涂布器浸在盛有 的烧杯中→将涂布器放在 上灼烧，待酒精燃尽、涂布器 后，再进行涂布→用涂布器将菌液均匀地涂布在 表面。涂布时可转动 ，使涂布均匀→涂布的菌液被培养基吸收后，将平板 ，放入 ℃的恒温箱中培养1～2 d。 三、微生物的数量测定 1．稀释涂布平板法 (1)原理：当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的 。通过 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为 的平板进行计数。 (2)注意问题：统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是因为 。 2．显微镜直接计数法 (1)方法：利用特定的 或 ，在显微镜下观察、计数。 (2)注意问题：统计的结果一般是 和 的总和。 判断对错： 1．选择分解尿素的细菌的培养基为液体培养基。( ) 2．用平板划线法培养计数，应选择菌落数在10～100的平板。( ) 3．统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数目。( ) 4．统计菌落数目的理论依据是一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。（ ） (√) 5．分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的pH降低。（ ） 6．在用涂布器涂布平板时，为了操作方便可完全打开培养皿盖。( ) 核心突破： 一、选择培养基 1．目的：从众多的微生物中分离所需要的微生物。 2．三种筛选方法的特点及举例 方法 特点 举例 利用微生物的营养特点进行选择培养 通过控制培养基的营养成分，使某种微生物能生长，其他微生物不能生长 利用只含有尿素一种氮源的培养基，可筛选出分解尿素的细菌 利用某种化学物质进行的选择培养 在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质对微生物产生的影响，抑制某些微生物，同时选择所需的微生物 加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 利用培养条件进行的选择培养 改变微生物的培养条件 将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物 合作探究： 1.如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物？ 2.要分离出分解纤维素的微生物，应在什么样的环境中取土样？应配制什么样的培养基？ 3.根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？ 典型例题： 例1．原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是(　　) A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用 B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基 C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上 D．在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种 例2．从自然菌样中筛选较理想